新清宁片—大黄素的测定—薄层扫描色谱法

本方法采用薄层扫描色谱法测定新清宁片中大黄素的含量。

本方法适用于由熟大黄等几味中药制成的新清宁片。

供试品粉末加甲醇适量置索氏提取器中提取至无色，甲醇溶液蒸干，残渣加稀盐酸30ml 、氯仿30ml 置水浴上加热回流1h ，再用氯仿提取3次，每次30ml，氯仿提取液蒸干，残渣加氯仿-甲醇(1∶1) 混合溶剂溶解，定量转移至10ml 量瓶中，并稀释至刻度,摇匀，点于硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-冰醋酸（15:5:0.3)为展开剂，展开，展距8.0cm，取出，凉干，置薄层扫描仪中，以双波长ls=445nm，lR=550nm反射锯齿扫描，测定大黄素的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇，苯，醋酸乙醋等（均为分析纯)

2. 大黄素（购自中国药品生物制品检定所)

1 仪器

1.1 薄层扫描色谱仪

1.2 自动点样仪

1.3 电子天平

2 实验条件

2.1 展开剂：苯 醋酸乙酯 冰醋酸=15 5 0.3，展距：8cm

2.3 薄层板：硅胶G薄层板

2.4 扫描波长：测定波长l_s=445nm，参比波长l_R=550nm。

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过65目筛)，精密称取药粉0.8g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品适量，用甲醇溶解制成浓度为0.3mg/ml，作为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品粉末加甲醇适量置索氏提取器中提取至无色，甲醇溶液蒸干，残渣加稀盐酸30ml 、氯仿30ml 置水浴上加热回流1h ，再用氯仿提取3次，每次30ml，氯仿提取液蒸干，残渣加氯仿-甲醇(1∶1) 混合溶剂溶解，定量转移至10ml 量瓶中，并稀释至刻度,摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

分别精密吸取上述对照液1 、2 、3 、4 、5、6μl，在同一硅胶G薄层板上进行带状点样，依法展开，扫描测定大黄素的吸收度值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液10μL点于硅胶G薄层板上，方法同上，用双波长扫描法测定大黄素的吸收度值，计算出其含量。

王仁英. 双波长薄层扫描法测定首乌片大黄素含量. 安徽中医学院学报，2000，19(2)：40-42.