方法名称： |
颠茄流浸膏—阿托品的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定颠茄流浸膏中阿托品的含量。 本方法适用于中成药颠茄流浸膏。 |
方法原理： |
供试品加水置分液漏斗中，用氨水调pH值，用乙醚萃取，合并萃取液用水洗涤后蒸去乙醚，残留物用硫酸溶解并稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测阿托品的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1. 乙腈（色谱纯) 2. 氨水 3. 乙醚 4. 0.004mol/L硫酸 5. 0.005mol/L戊烷磺酸钠 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 岛津CLC-C8柱 (150 × 6mm)，理论板数按硫酸阿托品峰计算1600。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相：乙腈 水 = 30 70 (含0.005mol/L戊烷磺酸钠，pH为6.50) 2.2 检测波长：210nm |
试样制备： |
1. 量取供试品 精密量取供试品0.5mL。 2. 对照品溶液的制备 精密称取硫酸阿托品对照品约10mg，置25mL容量瓶中，用0.004mol/L硫酸溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。 3. 标准溶液的制备 精密量取对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置10mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 4. 供试品溶液的制备 将供试品加约30mL水稀释后置分液漏斗中，用氨水调pH9.0-9.5，用乙醚萃取3次，每次15mL，合并萃取液，用10mL水洗涤后分次置硬质试管内于水浴上，蒸去乙醚，残留物用0.004mol/L硫酸溶解并稀释至25mL，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线的绘制 精密吸取上述标准溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定阿托品的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取上述供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定阿托品的吸收值，计算出其含量。 |
参考文献： |
李海生，贾晓颖，于俊玫等. 离子对色谱技术用于颠茄流浸膏及片剂中阿托品的分析. 药物分析杂志，1990，10(6)：324-328. |
