香连丸—黄连素的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定香连丸中黄连素的含量。

本方法适用于中成药香连丸。

供试品于容量瓶中，加HCl－CH₃OH超声提取，放冷，摇匀，滤过，滤液注入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长345nm处检测黄连素的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇（色谱纯)

2.乙腈（色谱纯)

3.盐酸

1仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

μBONDAPAK-C₁₈(3.9mm×250mm,10μm)

1.3紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 磷酸盐缓冲液(PH5.2) 甲醇 ＋1.3％SDS = 5 6 1 1

2.2检测波长：345nm

1.称取供试品

精密称取香连丸（过3号筛)1.116g。

2.对照品溶液的制备

精密称取105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品11.36mg置于50mL容量瓶中，加适量乙醇使溶解，并加乙醇至刻度，作为盐酸小檗碱对照品溶液。

3. 标准溶液的制备

分别精密吸取上述盐酸小檗碱对照品溶液1mL,2mL,3mL,4mL置10mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置50mL容量瓶中，加HCl-CH₃OH(1:100)至刻度超声处理30min，放冷至室温，加HCl-CH₃OH至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线绘制

将上述系列标准浓度的对照品溶液，各进样10μL，以峰面积积分值对浓度进行回归，绘制标准曲线。

2.供试品溶液的测定

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长345nm处测定黄连素的峰面积积分值，用外标法计算出黄连素的含量。

陈向阳，吴韶铭，施芬.香连丸中黄连素的HPLC法测定.中成药，1998，20(9):15-17