双唑泰栓－甲硝唑、克霉唑与醋酸氯己定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定双唑泰栓中甲硝唑、克霉唑与醋酸氯己定的含量。

本方法适用于双唑泰栓。

供试品置70~80℃水浴上温热熔融，经流动相溶解进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长260nm处检测甲硝唑、克霉唑与醋酸氯己定的峰面积，计算出其含量。

1. 甲醇

2.三乙胺

3. 庚烷磺酸钠

4. 磷酸

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按克霉唑峰计算应不低于2500，甲硝唑峰、克霉唑峰与氯己定峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水 三乙胺=70 30 0.3（含庚烷磺酸钠10mmol/L，用磷酸调pH值至4.0)

2.2 检测波长：260nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取供试品10粒，精密称定，置小烧杯中，置70~80℃水浴上温热熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于甲硝唑20mg)为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取甲硝唑、克霉唑与醋酸氯己定对照品适量，用流动相溶解并定量稀释，制成每1mL约含甲硝唑200µg、克霉唑160µg与醋酸氯己定80µg的溶液，即为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

取供试品置100mL量瓶中，加流动相适量，置70~80℃中充分振摇10分钟，使供试品溶解，冷却至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却2小时，取出迅速滤过，待续滤液放置至室温，即为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长260nm处测定甲硝唑（C₆H₉N₃O₃)、克霉唑（C₂₂H₁₇ClN₂)与醋酸氯己定（C₂₂H₃₀Cl2N10·2C₂H₄O₂)的峰面积，计算出其含量。