［摘 要］ 目的：调查慢性前列腺炎细菌感染情况及几种主要细菌对多种抗生素的耐药性监测，为有效控制慢性前列腺炎提供实验室依据，指导临床用药。方法：对385例慢性前列腺炎患者采用MearesStamey四段取样法作前列腺液细菌培养和药敏试验，对长期使用抗生素及原因不明的感染患者加做L型细菌培养及药敏试验。结果：在385例慢性前列腺炎患者普通细菌培养共分离出123例阳性标本，阳性率为31.9％。葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％(其中凝固酶阴性葡萄球菌感染64例，占16.6％；凝固酶阳性葡萄球菌感染28例，占7.2％)；链球菌感染18例，占4.6％，革兰阴性杆菌感染13例，占3.4％；L型细菌培养12例，阳性率为3.2％；混合感染病例为11例，占2.9％。结论：慢性前列腺炎的细菌感染分布以革兰阳性球菌为主，其中凝固酶阴性葡萄球菌所占的比例最高；对于长期大量使用抗生素而普通培养阴性的患者加做L型细菌培养，对提高慢性前列腺炎细菌感染检出率有重要的意义；对于细菌引起的慢性前列腺炎，在选用的抗生素中，由于不同的细菌对药物的敏感性不同，选择敏感的药物对有效治疗慢性前列腺炎有重要的意义。
［关键词］ 四段取样法慢性前列腺液细菌培养；细菌鉴定；药敏试验
慢性前列腺炎在成年男性人群中具有较高的发病率，近年来尤呈上升趋势，是男性学科最常见的但又难以有效治愈的严重疾病之一。患者病程迁延，由于长期大量使用抗生素，造成反复发作，难以治愈。我院针对临床慢性前列腺炎患者采用Meares［4］“四段法”进行细菌培养及药敏试验并检测细菌β内酰胺酶、MRSA、MRCNS和ESBL，及时为临床提供耐药菌株信息，对合理使用抗生素和对因治疗前列腺炎起到重要作用。
1 材料及方法
1.1 标本来源及样本采集 2002年10月至2004年9月本院泌尿外科门诊患者385例，年龄20岁~70岁，平均年37岁，临床疑为慢性前列腺炎患者。取样前先做外阴及尿道外口消毒，采用初始尿(VB1)、中段尿(VB2)、前列腺液(EPS)及终末尿(VB3)MearesStamey四段取样法取前列腺液及尿液于无菌试管内送检。
1.2 普通细菌培养 分别将VB1、VB2、VB3、EPS定量接种于血琼脂平板和巧克力平板上，(35±1)℃5%~10％二氧化碳培养24 h，做细菌菌落计数及细菌鉴定。以EPS+VB3的细菌计数>VB1+VB2细菌计数的2倍为阳性，否则为阴性［4］。L型细菌培养：对培养阴性，长期使用抗生素反复感染患者加做L型细菌培养。将EPS定量接种于L型高渗增菌培养基，(35±1)℃ 5%~10%二氧化碳培养6 d内观察结果，培养增菌液混浊或附壁细菌生长时，转种于血平板或L型固体培养基。培养基来来源：L型高渗增菌培养基：卫生部上海生物制品研究所产生。L型固体培养基：新鲜牛肉浸液80 ml，蛋白胨2 g，氯化钠5 g，琼脂0.8 g，明胶3 g加热溶解后，校正pH 7.4~7.6，121 ℃高压灭菌20 ml，待冷至56 ℃左右时，加入灭活人血浆20 min，倾注平板，冷却后放4 ℃冰箱备用。
1.3 菌株鉴定及药敏试验 采用湖南天地人公司提供半自动细菌鉴定仪及鉴定板，包括细菌鉴定及药敏试验，ESBL及β内酰胺酶检测。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853，由河南省临床检验中心提供。
2 结果
2.1 鉴定结果 在385例慢性前列腺炎患者中分离出123例阳性标本，阳性率为31.9%。其中葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％(其中凝固酶阴性葡萄球菌感染64例，占16.6%；凝固酶阳性葡萄球菌感染28例，占7.2％)；链球菌感染18例，占4.6％；革兰阴性杆菌感染13例，占3.4％，见表1。
2.2 药敏试验 见表2。
2.3 L型细菌培养结果 共培养出12例，阳性率为3.2％。其中肠球菌感染6例，表皮葡萄球菌感染4例，金葡萄球菌感染1例，中间型葡萄球菌1例。
2.4 混合感染病例 123例阳性结果中有11例为混合感染病例，其中肠球菌与表皮葡萄球菌感染2例，溶血葡萄球菌与大肠埃希菌感染2例，表皮葡萄球菌与中间型埃希菌感染2例，金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌感染2例，奇异变形杆菌与大肠埃希菌感染1例，表皮葡萄球菌与草绿色链球菌感染1例。
表1 123例慢性前列腺液中病原菌的种类及所占比例（略)
2.5 MRS检测结果 在凝固酶阳性葡萄球菌感染28例，MRSA13例，占46.4%；凝固酶阴性葡萄球菌感染64例，MRSCNS 20例，占31.2％。β内酰胺酶检测，葡萄球菌阳性25例，占27.1％；阴性67例，占72.9%。
3 讨论
慢性前列腺炎是成年男性常见的疾病，以发病缓慢，病因病理复杂，反复发作，经久难愈为特点，前列腺炎分为细菌性前列腺炎和非细菌性前列腺炎两类，临床上以非细菌性前列腺炎为主。近年来，随着抗生素的广泛使用及性病的蔓延，细菌性前列腺炎比率在逐年增高。因此了解慢性前列腺炎细菌的感染情况，选用敏感的抗生素对因治疗，对慢性前列腺炎的治疗有极其重要的临床意义。
20世纪60年代后期，Meares等［4］提出了下尿路感染定位诊断的“四段法”，并被视为确定前列腺细菌感染的金标准。从本组“四段法”分离的123例病例的检查结果看，慢性前列腺炎患者前列腺液细菌培养阳性率31.9％较高，并以革兰阳性菌多见，主要是凝固酶阴性葡萄球菌，www.med126.com肠杆菌和链球菌也占有相当的比例。目前临床上已有大量资料证明葡萄球菌是细菌性前列腺炎的主要致病菌［2，3］。本组试验中分离葡萄球菌92例，其中凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)感染64例，表皮葡萄球菌占39例，占10.1％。由于患者长期使用抗生素，使普遍认为没有致病性的凝固酶阴性的表皮葡萄球菌成为机会感染的重要病原菌。表皮葡萄球菌能产生粘质物，粘质解体后，可使细菌粘附于细胞表面，能保护细菌免受中性粒细胞的吞噬和减弱抗生素的渗透性，促进了CNS的感染，使之在一定条件下成为机会感染的重要条件致病菌。表皮葡萄球菌在男性前列腺炎的致病特性，应引起临床的高度重视。凝固酶阳性葡萄球菌感染28例，感染率占7.2％；其次为链球菌感染18例，感染率为4.6％；革兰阴性杆菌感染13例，感染率3.4％。
对EPS细菌培养阳性者，应根据药敏试验选择合适的抗生素进行治疗。本试验MRS检测表明MRSA46.4％，MRSCNS 31.2％；β内酰胺酶检测阳性为27.1％。由于MRSA对β内酰胺酶类抗生素不论药敏结果如何均视为耐药，所以在治疗MRSA、MRSCNS感染时有选择的抗生素范围很窄。以往认为的治疗慢性细菌性前列腺炎，大环内酯类、复方新诺明和喹诺酮类等是比较好的药物。但从耐药性监测表明，对于革兰阳性球菌引起的慢性前列腺炎，青霉素和红霉素，喹诺酮类药物(环丙沙星与氧氟沙星)，葡萄球菌均显示较高的耐药性，已不能作为治疗用药，从药敏分析可以看出，二、三代头孢与三代喹诺酮的左氧氟沙星耐药率低，可以作为经验性治疗用药；对于肠杆菌科细菌引起的慢性前列腺炎，肠杆菌科细菌均对氨苄西林显示极高的耐药性，而对其他β内酰胺类抗生素均较敏感，因此二、三代头孢菌素与三代喹诺酮左氧氟沙星是比较好的治疗药物，庆大霉素和环丙沙星可作为次选药物。另外，在所有的肠杆菌科细菌当中，未检出产超广谱β内酰胺酶(ESBL)菌株。在链球菌属中(以肠球菌为主)，细菌对青霉素、氨苄西林、高剂量庆大霉素及万古霉素较敏感，可作为首选及次选药物，而对大环内酯类抗生素、四环素类抗生素、利福平与克林霉素均显示较高耐药率。本试验未检出耐万古霉素的肠球菌(VER)。
在一般细菌培养阴性者除考虑厌氧菌、支原体与衣原体外，L型细菌感染可能也是重要的因素。本实验在检测阳性的L型EPS细菌培养中已初步得到证实，因此对原因不明前列腺炎者除做EPS常规细菌培养外，应同时进行L型细菌的培养，这对提高确诊率，减少漏诊误诊很有必要。本文检测了385例慢性前列腺炎患者的EPS，其中按常规方法培养细菌，阴性率为68％(262例)，在262例常规培养阴性的标本中，细菌L型培养则又培养到12例L型细菌，占4.5％(12／262)。表明对慢性前列腺炎患者在做细菌常规培养的同时，进行细菌L型培养，可提高检出率。尤其是接受过各种抑制细胞壁合成的抗生素治疗的患者，已使细菌呈不同程度的缺壁状态，细菌常规培养可能呈阴性。故建议在临床上对慢性反复发作、经久难愈的前列腺炎患者，应加做细菌L型培养。
慢性前列腺炎混合感染是疾病久治不愈、细菌耐药性增高的因素之一，主要表现为细菌性和非细菌性病原体感染同时存在，两种细菌同时存在的混合感染。本试验结果表明123例阳性结果中就有11例为混合感染病例(其中有阳性球菌与阴性杆菌，凝固酶阳性的葡萄球菌与凝固酶阴性的葡萄球菌，肠球菌与葡萄球菌等)。因此，对慢性前列腺炎病程较长的患者，临床更应注重前列腺液细菌学的检测，针对病因进行有效治疗是一个重要的环节。由此可见EPS的细菌学检测对临床诊治慢性前列腺炎具有重要意义。抗生素是治疗慢性前列腺炎的常用方法，但不可忽视医源性前列腺炎在目前慢性前列腺炎中所占比例逐渐增高的事实。文献报道，在院内感染中革兰阳性球菌感染呈逐年上升趋势，而在慢性前列腺炎感染方面，这种现象更为突出。其原因无不与临床上大量滥用抗生素，引起多重耐药性相关。慢性前列腺炎患者病程越长，应用抗生素种类越多，其耐药性越高。所以，选用恰当的药物，规范、针对性用药，对防止慢性前列腺炎的迁延和复发有重要意义。
参考文献：
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