公开(公告)号 | CN1116413C |
公开(公告)日 | 2003.07.30 |
申请(专利)号 | CN99121831.0 |
申请日期 | 1999.10.19 |
专利名称 | 人视黄醇结合蛋白基因的高效表达及其专用引物 |
主分类号 | C12N15/12 |
分类号 | C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所 |
发明(设计)人 | 徐琪寿;梁学颖;黄英武;刘云;刘志红;刘耀清 |
地址 | 100850北京市海淀区太平路27号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 |
代理人 | 关畅 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种人视黄醇结合蛋白基因的高效表达方法,其特征在于由以下步骤组成:(1)从人肝组织中提取总RNA;(2)合成上游引物P1:5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’下游引物P2:5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’;(3)通过逆转录聚合酶链式反应得到人视黄醇结合蛋白基因片段;(4)将基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表达载体中;(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表达。 |
摘要 | 本发明公开了一种人视黄醇结合蛋白的基因高效表达方式及其专用引物,其方法为:(1)从人肝组织中提取总RNA;(2)合成上游引物P1:5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’;下游引物P2:5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’;(3)通过逆转录聚合酶链式反应得到人视黄醇结合蛋白基因片段;(4)将基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表达载体中;(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表达。本发明公开的专用引物,上游引物为P1:5’TTT GAA TTC ATA TGG AGC GCT ACT GCC GAG TGA G3’;下游引物为P2:5’TTT GGATCC CTA CAA AAG GTT TCT TTC 3’。本方法具有表达量高,成本低等优点。 |
国际公布 |