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酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法

公开(公告)号 CN1438316A  
公开(公告)日 2003.08.27  
申请(专利)号 CN03113968.X  
申请日期 2003.03.21  
专利名称 酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法  
主分类号 C12N15/81  
分类号 C12N15/81;C07K14/435  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 暨南大学  
发明(设计)人 谢琪璇;潘善培  
地址 510632广东省广州市天河区黄埔大道西601号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 广州华进联合专利商标代理有限公司  
代理人 王东亮  
国省代码 广东;44  
主权项 一种酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法,采用受体菌GS115、目的蛋白及载体质粒、线性化酶等;包括的步骤有扩增目的蛋白片段、重组质粒的构建、重组质粒的筛选和鉴定、重组质粒导入Pichia pastoris表达系统、重组子(工程菌)的筛选、重组蛋白的表达、重组蛋白的纯化,其特征是:所述目的蛋白是23~408位基酸基因片段;所述的载体质粒是pPIC9k;所述重组质粒构建时,插入该载体质粒的ZP3目的基因片段是在前面引入了6个组氨酸序列的23~408位氨基酸;所述的重组质粒导入前,先将重组质粒用SacI酶进行线性化,然后从酵母基因组的AoxI基因处插入。  
摘要 本发明公开了一种酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法,载体质粒为pPIC9k,目的蛋白选用了23~408位氨基酸,串联组氨酸序列片段连在目的蛋白的N末端,导入前采用SacI酶对重组质粒进行线性化。表达生成的ZP3蛋白分泌及溶解性好,便于应用。  
国际公布  
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