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鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因诊断试剂盒及检测方法

公开(公告)号 CN1448518A  
公开(公告)日 2003.10.15  
申请(专利)号 CN03114367.9  
申请日期 2003.05.06  
专利名称 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因诊断试剂盒及检测方法  
主分类号 C12Q1/68  
分类号 C12Q1/68  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中山大学  
发明(设计)人 何建国;邓敏;翁少萍;黄志坚  
地址 510275广东省广州市新港西路135号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 广东;44  
主权项 一种鳜鱼传染性脾肾坏死病毒的基因诊断试剂盒,其特征是该试剂盒包括下列部件:1).样品稀释液A液,2管,内装磷酸缓冲液(1×PBS),pH7.4;2).模板抽提液B液,1管,内装酚/氯仿/异戊醇,比例为25∶24∶1;3).C液,1管,内装5M NaCL;4).D液,1管,内装无水乙醇;5).E液,1管,内装70%乙醇;6).F液,1管,内装灭菌双蒸水;7).PCR反应液G液,1管,内装PCR一扩反应液,包括ddH2O、含mg2+的10×Buffer、dNTP、外引物F1、外引物R1和TaqE F1为:5’-AGA CCC ACT TGT ACG GCG,R1为:5’-CCC ATGTCC AAC GTA TAG C;8).PCR反应液H液,1管,内装PCR二扩反应液,包括ddH2O、含mg2+的10×Buffer、dNTP、内引物F2、内引物R2和TaqE;F2为:5’-CGT GAG ACC GTG CGT AGT,R2:5’-AGG GTGACG GTC GAT ATG;9).阳性对照I液,1管,内装ISKNV阳性DNA。10).盒子;11).一块泡沫板,其大小与上述盒子的底面相同,装于盒子中;泡沫板上有不少于上述小管数量的小孔,上述各小管分别对应放置于这些小孔中。  
摘要 本发明提供一种鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV,Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因保守区序列设计的两对引物为主体而设计的。本发明采用聚合酶链式反应(PCR)技术,对传染性脾肾坏死病毒的特异性DNA核酸片段进行定性检测,简便快速,特异性好,灵敏度高。可运用于鳜鱼各时期养殖过程中的病毒跟踪检测,也可用于环境监测,避免病毒传播流行,提高科学管理效率,具有很高的实用价值。  
国际公布  
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