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海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法

公开(公告)号 CN1132936C  
公开(公告)日 2003.12.31  
申请(专利)号 CN01107824.3  
申请日期 2001.02.23  
专利名称 海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法  
主分类号 C12N7/02  
分类号 C12N7/02  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 国家海洋局第一海洋研究所  
发明(设计)人 孙修勤;曲凌云;张进兴  
地址 266061山东省青岛市仙霞岭路1号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 青岛海昊知识产权事务所有限公司  
代理人 张中南  
国省代码 山东;37  
主权项 一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法,其特征步骤是A、取病鱼体表囊肿物每20g左右,用无菌生理盐水多次洗净,再用组织研磨器研碎,然后加无菌TE缓冲液200ml,在室温下、-20℃冻融4次,之后将上述融液用孔径为8、3、0.8和0.3μm的微孔滤膜从大到小依次抽滤,再将滤液移入透析袋中用聚乙二醇2000浓度缩至7ml左右,便可取得该病毒悬液移入无菌的试管中,B、将配制好浓度为50%、40%、30%、20%和15%的蔗糖溶液,各取1ml,依次注入离心管中、并静静重层,然后,吸上述滤膜过滤的病毒悬液1ml,静静注于离心管内重层的蔗糖溶液上方2400rmp离心2小时,离心后即得纯度高的病毒。  
摘要 本发明涉及一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法。它是采用微孔滤膜过滤法和蔗糖密度梯度离心法相结合的方法,并考虑到尽量减小污染和保证无菌操作条件制成。本发明的特点是可以获得高纯度和高得率的淋巴囊肿病毒,以满足制备疫苗或作为病毒基因学、致病基因筛选和克隆技术使用的病毒。  
国际公布  
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