| 公开(公告)号 | CN1137135C |
| 公开(公告)日 | 2004.02.04 |
| 申请(专利)号 | CN97112602.X |
| 申请日期 | 1997.05.16 |
| 专利名称 | 来源于八棱丝瓜的核糖体失活蛋白 |
| 主分类号 | C07K7/06 |
| 分类号 | C07K7/06;C07K1/36;A61K38/08;A61P35/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院福建物质结构研究所 |
| 发明(设计)人 | 陈明晃;林玉娟;叶晓明 |
| 地址 | 350002 福建省福州市鼓楼区山头角123号 |
| 颁证日 | 2004.02.04 |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 福建;35 |
| 主权项 | 一种来源于八棱丝瓜的核糖体失活蛋白-八棱丝瓜蛋白1，其特征在于，N端氨基酸顺序为：Asp-Val-Ser-Phe-Ser-，分子量为28KD，具有强烈抑制细胞内核糖体蛋白质合成的活性，该蛋白是由包括以下七个步骤分离得到的核糖体失活蛋白：(1)八棱丝瓜籽经粉碎后，加盐溶液抽提、匀浆两次，置4℃过夜；(2)加1N盐酸调pH3.8，静置2小时，过滤或离心得上清液；(3)进一步加固体硫酸铵分级沉淀，离心得40％-95％饱和度的硫酸铵沉淀；(4)上述硫酸铵沉淀对pH6.5，5mM磷酸钠缓冲液透析24h，超速离心得上清液；(5)上清液上样CM-52纤维素柱，用0-0.3M NaCl，pH6.5，5mM磷酸钠缓冲液梯度洗脱，280nM实时检测流出液，收集峰3；(6)合并峰3，对pH7.2，10mM磷酸钠缓冲液透析，透析液加入DEAE纤维素-52搅拌后过滤；(7)滤液再上CM-52纤维素柱，用0-0.5M NaCl，pH7.2，10mM磷酸钠缓冲液梯度洗脱，280nM实时检测流出液，收集一尖峰，该峰即为纯化的八棱丝瓜蛋白1。 |
| 摘要 | 从葫芦科植物八棱丝瓜种子中分离出2种核糖体失活蛋白—八棱瓜蛋白1和2，其分子量都是28KD(SDS-PAGE检测)。八棱瓜蛋白1的N端5个氨基酸残基为DVSFS。采用了简化的温和的提取方法，获得了高产率，高纯度，高活性的蛋白。该蛋白具有作为引产药物和抗病毒制剂的商业应用，并可作为N-糖苷酶用于分子生物学和免疫学研究。 |
| 国际公布 |
