一种筛选人组织相容性抗原(HLA)的T细胞表面抗原肽的体系,及其在制备MHC-抗原肽多聚体中的应用
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公开(公告)号
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CN1511958A
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公开(公告)日
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2004.07.14
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申请(专利)号
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CN02159974.2
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申请日期
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2002.12.31
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专利名称
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一种筛选人组织相容性抗原(HLA)的T细胞表面抗原肽的体系,及其在制备MHC-抗原肽多聚体中的应用
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主分类号
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C12Q1/68
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分类号
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C12Q1/68;G01N33/68;C07K14/435;C07K14/47;A61K38/17;A61P37/06
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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王小宁
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发明(设计)人
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徐小宁;王小宁
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地址
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510630广东省广州市天河北路599号1801
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种筛选人组织相容性抗原(HLA)的T细胞表面抗原肽的方法，其包括以下步骤：(1)用iRNA技术制备表达不同HLA抗原(包括I类和II类抗原)的、内源性抗原肽提呈表达缺陷的T2样细胞系；(2)制备人主要及次要组织相容性抗原的肽链基因库；(3)利用步骤(2)制备的基因库，制备噬菌体肽展示体系；(4)把步骤(1)制备的T2样细胞系与步骤(3)制备的噬菌体混合；(5)洗涤去除不结合的噬菌体；(6)利用抗噬菌体衣壳蛋白抗体检测噬菌体结合的情况和条件；(7)用洗脱液进行梯度洗脱去除亲和性不高的噬菌体；(8)加入噬菌体敏感宿主大肠杆菌使T2样细胞上的噬菌体感染大肠杆菌，并得以扩增；(9)由大肠杆菌中进一步分离噬菌体质粒，并对其中的cDNA克隆测序、筛选出与MHC分子结合的肽段序列；(10)合成所筛选的肽段，结合至T2样细胞用该细胞刺激T细胞反应，确认肽段T细胞表位活性。
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摘要
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本发明属生物医药领域，是关于一种筛选人组织相容性抗原(HLA)的T细胞表面抗原肽的体系，及其在制备MHC-抗原肽多聚体中的应用。利用该组抗原肽制备的MHC-肽四聚体(MHC tetramer)可用于同种移植排斥反应的监测，并指导临床合理使用免疫抑制剂。
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国际公布
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