| 公开(公告)号 | CN1519321A |
| 公开(公告)日 | 2004.08.11 |
| 申请(专利)号 | CN03150703.4 |
| 申请日期 | 2003.09.01 |
| 专利名称 | 一种构建人载脂蛋白AIm表达基因的制备方法 |
| 主分类号 | C12N15/12 |
| 分类号 | C12N15/12;C12N15/63;C12P21/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海凯曼生物科技有限公司 |
| 发明(设计)人 | 龚邦强;丁满生;张梅芳 |
| 地址 | 200233上海市漕河泾高科技开发区田林路219号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海开祺专利代理有限公司 |
| 代理人 | 费开逵 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种获得高活性的人载脂蛋白pro-ApoAIm的制备方法由下列步骤组成：a、设计pApoAIm PCR引物核苷酸序列制成pro-ApoAIm基因；b、构建表达基因PET12a/PApOAIm重组质粒；c、工程菌构建；d、构建的工程发酵；e、pro-ApoAIm蛋白的纯化；f、pro-ApoAIm蛋白二聚体的制备。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种构建人载脂蛋白AImilano表达基因的制备方法。该方法采用PCR引物制成pro-ApoAIm的基因，构建表达基因PET12a/PAPOAIm重组质粒再进行工程菌的构建，然后构建的工程菌在一定的发酵条件下发酵，进行pApoAIm的蛋白纯化，纯化的蛋白再制成pro-ApoAIm蛋白二聚体形式。本方法具有pro-ApoAIm比ApoAIm性质更稳定，在大肠杆菌表达体系中采用T7启动子表达载体pET12a，用IPTG诱导目的蛋白的生产，产生蛋白是包涵体，它能有效防止蛋白水解酶对异源蛋白的水解等特点。 |
| 国际公布 |
