| 公开(公告)号 | CN1641026A |
| 公开(公告)日 | 2005.07.20 |
| 申请(专利)号 | CN200410025834.4 |
| 申请日期 | 2004.01.17 |
| 专利名称 | 基因工程重组胸腺素α1的制备工艺 |
| 主分类号 | C12N15/16 |
| 分类号 | C12N15/16 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 党化宁 |
| 发明(设计)人 | 党化宁 |
| 地址 | 710118陕西省西安市高新技术产业开发区长安科技园西部大道66号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 西安新思维专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 黄秦芳 |
| 国省代码 | 陕西;61 |
| 主权项 | 基因工程重组胸腺素α1的制备工艺，其特征在于：它它依次包括下述步骤，(1)、重组Tα1基因工程菌的构建：按照大肠杆菌惯用密码子将Tα1的28个氨基酸转化为核苷酸序列，在其基因前依次设计上核酸内切酶EcoRI、蛋氨酸、内切酶BaomHI、天冬酰氨和甘氨酸对应的核苷酸序列；在其基因后依次设计上甘氨酸、核酸内切酶BglII、终止密码子和核酸内切酶PstI对应的核苷酸序列，采用克隆载体酶切后实现基因的串联EcoRIMetBamHIAsnGly——GlyBglIIStopPstIGAATTCATGGGATCCAACGGC——GGCAGATCTTGACTGCAG得到Tα1的n(2-8)串体，分别表示为Tα1①、Tα1②、Tα1③……Tα1其表达载体转化大肠杆菌得到基因工程菌；(2)对基因工程菌进行诱导表达；(3)基因工程菌的培养和高密度发酵；(4)融合蛋白的粗提、纯化和裂解：①所述粗提用高温骤冷方法；②所述纯化是层析方法；③所述裂解是用羟胺法进行裂解，裂解出天然Tα1单体。 |
| 摘要 | 本发明涉及基因工程药物生物技术领域，具体涉及基因工程重组胸腺素α1的制备工艺。本发明要克服现有技术存在的成本高、价格昂贵，样品纯化复杂且污染环境的问题。它依次包括下述步骤，(1)重组胸腺素α1基因工程菌的构建：按照大肠杆菌惯用密码子将Tα1的28个氨基酸转化为核苷酸序列，在其基因前依次设计上核酸内切酶EcoRI、蛋氨酸、内切酶BamHI、天冬酰氨和甘氨酸对应的核苷酸序列；在其基因后依次设计上甘氨酸、核酸内切酶BglII、终止密码子和核酸内切酶PstI对应的核苷酸序列，采用酶切后实现基因的串联，得到Tα1的n(2-8)串体；(2)对基因工程菌进行诱导表达；(3)诱导基因工程菌的培养和高密度发酵；(4)融合蛋白的粗提、纯化和裂解；(5)胸腺素α1的纯化。 |
| 国际公布 |
