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重组人甲状旁腺激素PTH(1-34)的制备方法

公开(公告)号 CN1212336C  
公开(公告)日 2005.07.27  
申请(专利)号 CN02153384.9  
申请日期 2002.11.29  
专利名称 重组人甲状旁腺激素PTH(1-34)的制备方法  
主分类号 C07K14/635  
分类号 C07K14/635;C12N1/21;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/02  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 西南生物工程产业化中试基地有限公司  
发明(设计)人 胡昌华;李明;何建军;徐辉  
地址 400060 重庆市南坪回龙工业区丹回路中试基地  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 北京华科联合专利事务所  
代理人 王为  
国省代码 重庆;85  
主权项 一种重组人甲状旁腺激素类似物,其基酸序列见序列表中序列1。  
摘要 本发明涉及重组人甲状旁腺激素PTH(1-34)的制备方法,该方法通过构建了一种新的工程菌株,使表达产量提高,纯化工艺简单,成本降低。本发明采用大肠杆菌简并密码子修改序列的对应cDNA,基本序列为L-V-P-R-PTH(1-34),其中L-V-P-R为凝血酶的酶切位点。在其核苷酸序列末端加大肠杆菌终止密码子TAA;为便于克隆,在序列的5’-端加EcoR I的酶切位点,3’-端加Sal I的酶切位点。通过对该工程菌的发酵、包涵体提取、稀释复性、凝血酶酶切、阴离子交换层析、反相层析、阳离子交换层析等步骤得到高纯度的重组人甲状旁腺激素PTH(1-34)。  
国际公布  
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