公开(公告)号 | CN1227031C |
公开(公告)日 | 2005.11.16 |
申请(专利)号 | CN00133104.3 |
申请日期 | 1993.06.03 |
专利名称 | 减毒水痘-带状疱诊病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用 |
主分类号 | A61K39/25 |
分类号 | A61K39/25;C12N7/00 |
分案原申请号 | 93106673.5 |
优先权 | 1992.6.4 US 893295;1992.6.4 US 894039 |
申请(专利权)人 | 麦克公司 |
发明(设计)人 | P·J·普罗沃斯特;D·L·克拉;P·A·弗里曼 |
地址 | 美国新泽西州 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 中国专利代理(香港)有限公司 |
代理人 | 谭明胜 |
国省代码 | 美国;US |
主权项 | 减毒水痘-带状疱疹病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用,其中水痘-带状疱疹病毒缩写为VZV,所述减毒病毒是用如下方法制备的:a.培养选自人二倍体细胞的VZV易感染细胞,使之汇合成单层培养物,并供给不能脂代谢的二糖;b.在接近汇合点时,感染步骤a培养的细胞,得到高感染复数的VZV感染细胞;c.将VZV感染培养物在高营养状态下维持22-96小时,并在感染性VZV产量达到峰值时收集;d.在收集VZV感染细胞前,用含有或不含有溶酶体营养剂的生理溶液洗涤VZV感染培养物;e.将VZV感染细胞收集到稳定溶液中,并且或者立即破碎细胞,或者冷冻这些细胞供以后破碎;f.破碎VZV感染细胞以释放细胞结合的VZV,并除去细胞碎片,以提供无细胞VZV制备物;其中VZV易感染细胞是MRC-5细胞,减毒VZV是水痘-带状疱疹病毒的Oka株,培养温度是在30-37℃之间,二糖是以20-60mM提供的蔗糖,感染复数是1∶25和1∶625之间,溶酶体营养剂是以20-50mM提供的氯化铵或以230μM提供的氯喹。 |
摘要 | 以较高的VZV产量制备活的减毒水痘-带状疱疹病毒疫苗。该新方法使活VZV疫苗的大量制备更为实用。另外,最佳单层细胞培养条件提供了一种提高单层细胞密度的方法,该方法可用于提高病毒疫苗的产量。根据该方法,在常规培养容器中通常获得接近500,000个细胞/cm2的细胞密度。 |
国际公布 |