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选定生物体的人工启动子文库和得自这种文库的启动子

公开(公告)号 CN1243827C  
公开(公告)日 2006.03.01  
申请(专利)号 CN97198703.3  
申请日期 1997.08.25  
专利名称 选定生物体的人工启动子文库和得自这种文库的启动子  
主分类号 C12N15/11(2006.01)I  
分类号 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)N  
分案原申请号  
优先权 1996.8.23 DK 0886/96  
申请(专利权)人 彼得·鲁戴尔·简森  
发明(设计)人 彼得·鲁戴尔·简森;卡林·哈默  
地址 丹麦根措夫特  
颁证日  
国际申请 1997-08-25 PCT/DK1997/000342  
进入国家日期 1999.04.09  
专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所  
代理人 黄革生  
国省代码 丹麦;DK  
主权项 一种启动子文库,所述文库包含一套各自不同的启动子序列,对待表达基因的启动子强度而言,该文库覆盖一个启动子活性范围;该套各自不同的启动子序列包含双链DNA序列,其有义链含有在所述生物体中鉴定出来的启动子序列的至少两个共有序列,在文库内的所有启动子序列中所述共有序列各自至少一半保持不变,并且,相对于所述已鉴定出的启动子的相应间隔区序列,在所述共有序列之间或至少一个所述共有序列侧翼的核苷酸间隔区序列的至少一部分已有所改变而包含随机选自核苷碱基A、T、C和G的核苷酸;在所述基因的启动子活性方面,该启动子文库以小步幅方式跨越了一个有用范围,每一步改变活性25-400%。  
摘要 选定生物体或生物体组的人工启动子文库被构建为双链DNA片段的混合物,所述双链DNA片段的有义链含有得自所述生物体或生物体组之有效启动子的至少两个共有序列或它们的包含各自至少一半的部分,以及长度可变的周围或中间核苷酸序列(间隔区),所述间隔区序列中至少7个核苷酸随机选自核苷碱基A,T,C和G。双链DNA片段的有义链也包含将特定的调节特征,如由生长条件的变化引起的激活作用,赋予文库内启动子的调节DNA序列。另外,它们还可能具有添加于其一端或两端的包含一个或多个限制性内切核酸酶识别位点的序列。选定生物体或生物体组可选自原核生物和真核生物;在原核生物中,保留的共有序列最经常地含有-35信号(-35至-30):TTGACA和-10信号(-12至-7):TATAAT,或者它们的包含各自至少3个保守核苷酸的部分,而在真核生物中,所述共有序列应含有TATA盒和至少一个上游激活序列(UAS)。这种人工启动子文库可用于例如在多种选定生物体中使特定基因的表达最优化。  
国际公布 1998-02-26 WO1998/007846 英  
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