网站首页
医师
药师
护士
卫生资格
高级职称
住院医师
畜牧兽医
医学考研
医学论文
医学会议
考试宝典
网校
论坛
招聘
最新更新
网站地图
您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:靶向肝癌AFP基因的siRNAs表达载体及其构建方法与用途专利检索:专利号/专利人/发明人
    

靶向肝癌AFP基因的siRNAs表达载体及其构建方法与用途

公开(公告)号 CN1249243C  
公开(公告)日 2006.04.05  
申请(专利)号 CN200310114614.4  
申请日期 2003.12.18  
专利名称 靶向肝癌AFP基因的siRNAs表达载体及其构建方法与用途  
主分类号 C12N15/63(2006.01)I  
分类号 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 济南市中心医院  
发明(设计)人 汪运山;亓同钢  
地址 250013山东省济南市解放路105号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 山东;37  
主权项 靶向AFP基因的siRNAs表达载体,其特征是,以pSilencer3.0-H1为载体,由H1启动子启动针对AFP基因的发夹状双链RNA分子的表达,本载体质粒针对AFP基因编码区序列5′-AACTCAGTGAGGACAAACTAT-3′,是用于与AFP相关的肝细胞癌的治疗性物质,由以下方法制得:(1)RNA干涉靶序列的选择及插入模板的设计与合成选择AFP基因编码区序列5′-AACTCAGTGAGGACAAACTAT-3′,设计并合成了两段互补的寡核苷酸序列,序列如下:5’-gatcccgctcagtgaggacaaactatttcaagagaatagtttgtcctcactgagttttttggaaa-3’,5’-agcttttccaa-aaaactcagtgaggacaaactattctcttgaaatagtttgtcctcactgagcgg-3’;(2)将上述合成的两段寡核苷酸与线性化的Psilencer3.0-H1的连接、转化、扩增及质粒的纯化首先将合成的两段寡核苷酸等量混合,90℃3min,37℃孵育1h,然后将结合的双链寡核苷酸与带有BamH1和HindIII粘性末端的Psilencer3.0-H1质粒连接,,最后,将连接成功的质粒转化DH5a大肠杆菌,经青霉素筛选,挑选耐药菌落大量培养,质粒的提取及纯化采用经典的碱裂解法和聚乙二醇质粒纯化法;(3)质粒的鉴定DNA琼脂糖凝胶电泳,及应用M13的通用测序引物进行测序,以确定合成的寡核苷酸是否已经转入pSilencer3.0-H1质粒中及是否有碱基异常存在。  
摘要 靶向肝癌AFP基因的siRNAs表达载体及其构建方法与用途,属于生物医药技术领域。以pSilencer3.0-H1为载体,由H1启动子启动针对AFP基因的发夹状双链RNA分子的表达,本载体质粒针对AFP基因编码区序列5′-AACTCAGTGAGGACAAACTAT-3′,是用于与AFP相关的肝细胞癌的治疗性物质。靶向AFP基因的siRNAs表达载体用于制备分泌AFP蛋白的肝癌的基因治疗药物。  
国际公布  
...
评论加载中...
网 名: (必填项)
评论内容:
关于我们 - 联系我们 -版权申明 -诚聘英才 - 网站地图 - 医学论坛 - 医学博客 - 网络课程 - 帮助
医学全在线 版权所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP备12017320号-1
百度大联盟认证绿色会员可信网站 中网验证