| 公开(公告)号 | CN1298734C |
| 公开(公告)日 | 2007.02.07 |
| 申请(专利)号 | CN200510042587.3 |
| 申请日期 | 2005.03.25 |
| 专利名称 | 一种聚乙二醇修饰蛋白质α-氨基的方法 |
| 主分类号 | C07K1/107(2006.01)I |
| 分类号 | C07K1/107(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 山东格兰百克生物制药有限公司 |
| 发明(设计)人 | 张雪山;徐宜铁 |
| 地址 | 250014山东省济南市历下区浆水泉路中段 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 济南舜源专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 袁春鹃 |
| 国省代码 | 山东;37 |
| 主权项 | 一种聚乙二醇修饰蛋白质α-氨基的方法，其特征在于采用氨基保护剂将处于蛋白质活性位点及受体结合部位易于反应的赖氨酸氨基封闭和选用具有氮端优势反应的聚乙二醇活化形式相结合的方式对蛋白质氮端不处于活性位点或受体结合部位的蛋白质进行特异性修饰；其步骤如下：(A)用二甲基马来酸酐封闭处于蛋白质活性位点及受体结合部位的ε氨基，二甲基马来酸酐的用量为蛋白质α-氨基与ε氨基mol数之和的8～12倍；(B)用醛基化的单甲氧基聚乙二醇对未封闭的蛋白质氮端α-氨基进行修饰，醛基化的单甲氧基聚乙二醇得用量为蛋白质α-氨基mol数的3～12倍，修饰反应需要有与聚乙二醇等量的NaBH3CN存在；(C)采用0.1mol/L的HCl调节pH至5.5-6.5，去除氨基保护剂；(D)提纯。 |
| 摘要 | 本发明提供了一种聚乙二醇修饰蛋白质α-氨基的方法。利用氨基保护剂将蛋白质中能与PEG反应的赖氨酸ε氨基封闭，以活化的具有与α氨基优势反应的PEG进行氨基修饰，再将氨基保护剂去除，得到氮端特异性PEG修饰的蛋白质衍生物。该方法所得产品转化率高，90％～95％；分子量与结构均一，均为蛋白质α-氨基N末端连接一个PEG分子，没有一个蛋白连接几个PEG的产物，也没有其他位点连接PEG的异构现象；体外活性降低很少，基本保持不变；体内活性实验明显长效，ANC升高幅度明显。 |
| 国际公布 |
