| 公开(公告)号 | CN1317298C |
| 公开(公告)日 | 2007.05.23 |
| 申请(专利)号 | CN200510036856.5 |
| 申请日期 | 2005.08.30 |
| 专利名称 | 中药决明子蛋白质的提取方法和应用 |
| 主分类号 | C07K14/415(2006.01)I |
| 分类号 | C07K14/415(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;A61K36/482(2006.01)I;A61K38/02(2006.01)I;A61P3/06(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 华南师范大学 |
| 发明(设计)人 | 李楚华;李续娥;郭宝江 |
| 地址 | 510630广东省广州市天河区石牌 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 广州粤高专利代理有限公司 |
| 代理人 | 何淑珍 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种中药决明子蛋白质的提取方法，其特征在于包括如下步骤：(1)决明子粗蛋白的提取，包括：——在4-8℃条件下，将决明子碾碎后用石油醚或环己烷浸泡脱脂24-48小时，分2-4次进行；——回收溶剂，残渣按1g：10ml-1g：50ml的体积浸泡于50mmol pH为8.0的KH2PO4-NaOH中8-12小时，重复3-5次，合并提取液；——提取液离心20-30min，取上清液；上清液边搅拌边加入硫酸铵至45％-55％的饱和度，离心分离，保留沉淀；沉淀物在分子量3,000-8,000的透析袋中进行脱盐；——冷冻干燥仪中-20℃至-80℃温度下进行冷冻干燥，得到粉末状决明子粗蛋白，-20℃冷藏备用：(2)决明子粗蛋白的提纯，包括：——将上述方法得到的粉末状决明子粗蛋白充分溶解于15mmol-25mmol pH为7.0-8.0的Tris-HCl的缓冲液中；——用分子筛层析柱进行初步纯化，分子筛层析柱上样前先用含有0.15-0.3mol NaCl的上述缓冲液平衡2-5倍柱体积；每次上样量为180μl-240μl，监测波长为280nm，流速为0.3-0.7ml/min；决明子粗蛋白经分子筛层析被分成5个峰：分别为peak1、peak2、peak3、peak4和peak5；(3)决明子蛋白质peak2的分离纯化，包括：用离子交换柱纯化peak2，离子交换柱按照A液与B液依次交替的程序平衡，A液为15mmol-25mmol pH为7.0-8.0的Tris-HCl，B液为含有1.0mol NaCl的A液；将peak2浓缩、脱盐，上样量为25mg-50mg/ml；柱子用0-1.0mol的NaCl梯度、15mmol-25mmol pH为7.0-8.0的Tris-HCl的缓冲液进行洗脱，流速为0.8-1.5ml/min；peak2经离子交换柱层析被分成3个峰，分别为：peak I、peak II和peak III，收集peakIII。 |
| 摘要 | 本发明涉及分子量为19680的中药决明子蛋白质的提取方法，包括：决明子粗蛋白的提取；决明子粗蛋白的提纯；决明子蛋白质peak2的分离纯化；得到的蛋白质能显著抑制细胞内胆固醇的合成，具有明显的降脂作用；本发明还涉及所述中药决明子蛋白质在制备降脂药物中的应用。 |
| 国际公布 |
