公开(公告)号 | CN1285737C |
公开(公告)日 | 2006.11.22 |
申请(专利)号 | CN200410046626.2 |
申请日期 | 2004.08.03 |
专利名称 | 硅壳纳米颗粒检测SARS病毒基因组片断的方法 |
主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 湖南大学 |
发明(设计)人 | 谭蔚泓;王柯敏;龚 萍;何晓晓 |
地址 | 410082湖南省长沙市河西岳麓山湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 湖南兆弘专利事务所 |
代理人 | 赵 洪 |
国省代码 | 湖南;43 |
主权项 | 一种硅壳纳米颗粒检测SARS病毒基因组片断的方法,其特征在于检测的具体过程为:1)、杂交:连接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片断的硅壳磁性纳米探针与含有SARS病毒基因片断及其它非SARS病毒基因片断的样品进行杂交;2)、磁分离:利用硅壳磁性纳米颗粒的磁性分离作用将SARS病毒基因组从混合样品中分离和纯化出来;3)、PCR扩增:以纯化的SARS病毒基因组作为模板,通过一对特定的引物5’-GATGGTAATA AGATA GCTGA CAAGT-3’和5’-CATCC ACGAA TTCAT GATCA-3’进行PCR扩增,得到100bp的扩增产物;4)、荧光检测,连接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片断的硅壳荧光纳米探针和扩增产物以及修饰有5’-Biotin-CATCCACGAATTCATGATCA ACATCCCTAT TTCT-3’cDNA片断的玻璃芯片以一种类似三明治结构的模型进行杂交,而后用激光共聚焦荧光显微镜对芯片进行扫描检测。 |
摘要 | 本发明公开了一种硅壳纳米颗粒检测SARS病毒基因组片断的方法,其特点是构建了用于SARS病毒检测的三明治模型,利用自制的修饰有与SARS病毒基因组特有序列互补的cDNA片断的硅壳磁性纳米探针对含有SARS病毒基因组的样本进行病毒基因组的提取与纯化,再在聚合酶链式反应(PCR扩增)对病毒基因片断进行扩增的基础上,用修饰有与SARS病毒基因片断特异序列互补的cDNA片断的硅壳荧光纳米探针及玻璃芯片对SARS病毒基因片断进行检测。本发明的检测方法具有快捷,灵敏度和特异性高,稳定性好的优点。 |
国际公布 |