公开(公告)号 | CN1259337C |
公开(公告)日 | 2006.06.14 |
申请(专利)号 | CN02120821.2 |
申请日期 | 2002.06.04 |
专利名称 | 人甲状旁腺激素基因突变体合成、表达、制备及应用 |
主分类号 | C07K14/635(2006.01)I |
分类号 | C07K14/635(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K38/29(2006.01)I;A61P19/10(2006.01)I;A61P19/08(2006.01)I;A61P3/00(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 北京双鹭药业股份有限公司 |
发明(设计)人 | 徐明波;王勇波;崔铁民;李亚军;王红丽;袁雪莲;张 蕊 |
地址 | 100041北京市石景山区八大处高科技园区 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | |
代理人 | |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种制备人甲状旁腺激素的方法,包括: (1)合成一条编码人甲状旁腺激素的基因,所述基因具有表1所示的核苷酸序列; (2)将(1)得到的基因序列克隆到原核表达载体中; (3)用(2)所述的表达载体转化原核细胞得到工程菌; (4)通过发酵技术扩增(3)中所得到的工程菌,得到人甲状旁腺激素的高水平表达。 |
摘要 | 本发明涉及一种重组人甲状旁腺激素(Parathyriod Hormone,简称PTH)的制备方法。本发明利用遗传密码的兼并性,设计了大肠杆菌偏爱的密码子,降低了DNA序列中的GC含量,合成了PTH的DNA序列。将PCR扩增的人PTH基因与原核表达载体如pET22b组装成高效表达质粒,转化大肠杆菌后用诱导剂诱导PTH基因表达,表达量达到菌体总蛋白的25-30%。工程菌经发酵扩增,破碎后保留上清。上清经处理后,进行离子交换层析和凝胶排阻层析二步法纯化产品。纯品加保护剂后制成药用冻干制剂。该制剂可用于由骨代谢病、骨质疏松所引起的各类疾病的治疗。 |
国际公布 |