公开(公告)号
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CN1293195C
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公开(公告)日
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2007.01.03
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申请(专利)号
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CN200510097997.8
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申请日期
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2005.09.02
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专利名称
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新城疫LaSota疫苗株反向遗传操作系统及其应用
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主分类号
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C12N15/86(2006.01)I
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分类号
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C12N15/86(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K39/17(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
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发明(设计)人
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步志高;陈化兰
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地址
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150001黑龙江省哈尔滨市市南岗区马端街427号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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中科专利商标代理有限责任公司
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代理人
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程金山
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国省代码
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黑龙江;23
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主权项
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一种制备负链RNA病毒的方法,包括以下步骤: (1)将转录质粒和转录辅助质粒共转染所述病毒复制许可的宿主细胞,培养转染后的宿主细胞; (2)收获上清液,过滤后继续敏感细胞传代或接种鸡胚尿囊腔救获病毒, 其中所述转录质粒是包含外源标签基因GFP的质粒pBRN-FL-GFP3,其核苷酸序列如图10所示, 其中所述辅助质粒包括如下三个质粒:包括编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列的质粒、包括编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列的质粒、和包括编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列的质粒; 其中所述宿主细胞是稳定表达T7聚合酶的细胞系。
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摘要
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本发明涉及一种新城疫LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统及其应用,该系统包含:转录质粒,该转录质粒包括所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的基因组cDNA序列;一个或多个转录辅助质粒,该辅助质粒包括编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列、编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列、和编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列;所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的宿主细胞。通过上述反向遗传操作系统,成功救获了野生型病毒株,并且为进一步开展新城疫病毒活载体疫苗研制及NDV病毒相关基础奠定了坚实的基础。
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国际公布
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