北草乌--生物碱含量测定方法--HPLC法

仪器设备  日本岛津公司LC-10A 液相色谱仪带SPD-M10A 二极管阵列紫外检测器和CLASS-LC10 工作站；ZFQ-5旋转蒸发仪（天津玻璃仪器厂)；8893E-MT 超声波清洗器（美国Coli-Parmer)

色谱条件  ODS柱（25mm×4.6mm)，流动相：甲醇-水-乙腈（67：33：2)，内含6mmol/lSDS，0.02mol/lNaH2PO4)，流速：1.0ml/min，检测波长:235 nm

对照品溶液的配制  准确称取新乌头碱3.0mg，次乌头碱2.7mg，乌头碱2.4mg，用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度，摇匀，即得.

供试品溶液的配制  分别取8份过6 目标准筛的北草乌根粉各200g盛于2500ml的细口瓶中，四份用于溶剂浸提，4份用于溶剂超声辅助浸提。分别加10%氨水300ml，放置2h充分浸润，然后分别两两加入1000ml苯、氯仿、乙醇、乙醚作为浸提溶剂，溶剂浸提时间为12h，每隔1h用力振摇，使分散均匀，当进行6h后，倾出溶剂，重新补加1000ml溶剂；超声辅助浸提两次，每次各1h，并不时用力振摇，当进行1h后，倾出溶剂，补加另1000 ml 溶剂，继续超声辅助浸提，浸提结束后，过滤，于旋转蒸发器上将溶液浓缩，回收溶剂，用2%的盐酸萃取4次，合并萃取液，加浓氨水调pH值至9，产生白色絮状沉淀，静止过滤后，干燥恒重得乌头生物碱.。取总乌头碱10.8mg，用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度，摇匀，即得。