方法名称： |
川黄柏-小檗碱、黄柏碱的含量测定-HPLC-UV |
应用范围： |
用于川黄柏中小檗碱、黄柏碱的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加甲醇-盐酸(100∶1)超声提取，经液相色谱分离，在350nm(小檗碱)、286nm（黄柏碱)处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 LC-10A高效液相色谱仪；SPD-10A检测器；C-R7Aeplus处理器(日本岛津公司)。 色谱条件 色谱柱：Luna C18 (2)色谱柱(150.0mm ×6.0mm，5μm，Phenomenex公司)；小檗碱的流动相：甲醇-磷酸缓冲液-十二烷基硫酸钠(60∶40∶0.1)；柱温：30℃；检测波长：350nm；流速1ml·min-1；黄柏碱的流动相：乙腈-0.4mol·L-1氯化氨(12∶88)，柱温：30℃；检测波长：286nm；流速1ml·min- 1 。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 取小檗碱对照品和黄柏碱对照品适量，精密称定，分别用甲醇配成58.0μg·ml-1小檗碱和159.2μg·ml-1黄柏碱对照品溶液 供试品溶液的制备 精密称取各供试品粉末0.2g(过40目筛)，甲醇-盐酸(100∶1)10ml超声振荡60min，过滤，精密量取续滤液0.5ml，减压旋蒸至干，加入15ml甲醇溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，作为测定小檗碱供试液。另精密称取各供试品粉末0.1g(过40目筛)，甲醇10ml浸泡过夜(大于12h)，超声振荡30min，过滤，续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤。作为测定黄柏碱供试液。 |
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各5μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
彭爱华，杨宏，杨林等.RP-HPLC测定不同采收期川黄柏中小檗碱、黄柏碱的含量.华西药学杂志. 2006，21(4)：377～379 |
