方法名称： |
连翘提取物-金丝桃素含量测定-HPLC-UV |
应用范围： |
用于连翘提取物中金丝桃素的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加1 %NaOH溶液索氏提取，经液相色谱分离，在590 nm处测定峰面积，用外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Waters 高效液相色谱仪，配有510泵，490 多功能紫外检测器，PCM 柱温控制Ⅰ型六通进样阀；HS色谱工作站（杭州英谱科技开发有限公司) 色谱条件 色谱柱：Spherisorb C18（4.6 mm ×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-乙酸乙酯- 0.1 mol/L磷酸二氢钠，其体积比为265：210：530；流速：1.0 mL/min；检测波长：590 nm；柱温：40 ℃；进样量：10 μL |
试样制备： |
对照品溶液的制备 取对照品1.0 mg，用甲醇少量超声波溶解，冷却后定容至5 mL，配成金丝桃素质量浓度为0.02 mg/mL的甲醇溶液。 供试品溶液的制备 取植物样品于60 ℃左右烘干，弃去茎杆，研碎，过40目筛，精密称取样品1.0000 g于小滤纸筒内，于索氏提取器中先用乙醚脱脂，至乙醚层基本无色为止。用30倍原料质量的1 %NaOH溶液在95～100 ℃沸腾状态下浸提2 h，提取3次，合并滤液，用0.1 mol/ L HCL溶液中和滤液至pH值3为止，真空浓缩干燥即得提取物。用甲醇溶解提取物，于10 mL容量瓶中定容，过滤，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取金丝桃素对照液以及贯叶连翘供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算金丝桃素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
程存归，孙翠荣. 野生及栽培贯叶连翘提取物中金丝桃素含量比较研究. 林产化学与工业.2004，24（4)：99~102 |
