含红参制剂—益气复脉口服液—红参的含量测定方法—HPLC-UV

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方法名称：

含红参制剂—益气复脉口服液—红参的含量测定—HPLC-UV

应用范围：

用于测定益气复脉口服液中红参的含量

方法原理：

本品先后用三氯甲烷脱脂，过大孔吸附树脂后，收集70%乙醇洗脱液，再过C18小柱，收集甲醇洗脱液经液相色谱仪分离，在203nm处测定，按外标法计算含量。

仪器设备及实验条件：

仪器设备岛津LC-2010 型高效液相色谱仪。

色谱条件色谱柱：YMC ODSA柱（150mm×4.5mm，5μm)；柱温：25℃；流动相：乙腈为流动相A，水为流动相B，按表1进行梯度洗脱：流速：1.0ml/min，检测波长：203nm。

表1　梯度洗脱条件

时间(min)	流动相A (% )	流动相B (% )
0～5	19	81
5～21	19→23	81→77
21～40	23→35	77→65
40～42	35→65	65→35
42～47	65	35
47～49	65→19	35→81

试样制备：

对照品溶液的制备　分别精密称取人参皂苷Rb1、Re、Rg1对照品适量，加甲醇使溶解并制成人参皂苷Rb1 1.002 mg/ml的溶液，人参皂Re11.047 mg/ml及人参皂苷Rg1 1.002mg/ml的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备　取本品30ml，用三氯甲烷30ml振摇提取，静置使分层，弃去三氯甲烷溶液，精密量取10ml，通过已处理好的大孔树脂柱(D101型，柱内径1. 5 cm，高10 cm，用20%乙醇溶液预洗)上，用20%乙醇溶液50 ml洗脱，洗脱液弃去，再用70%乙醇溶液100ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣用20%甲醇溶液溶解并转移至10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml，通过C18小柱(0.5g，用20%甲醇溶液预洗)，用20%甲醇溶液10ml洗脱，弃去，再用甲醇20ml洗脱，收集甲醇洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶解并定量转移至5 ml量瓶内，稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜( 0. 45μm)滤过，取续滤液，即得。

操作步骤：

分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件，测定峰面积，以外标法计算人参皂苷Rb1、Re 、Rg1含量

附件：

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备注：

参考文献：

任睿，贾宜军，金红宇. HPLC测定益气复脉口服液中红参的含量. 现代食品与药品杂志.2006.16（4)：8～11

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