红豆杉—紫杉醇的含量测定方法—HPLC-UV

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方法名称：

红豆杉—紫杉醇的含量测定—HPLC-UV

应用范围：

用于人工栽培南方红豆杉中紫杉醇的含量测定

方法原理：

本品粉末用二氯甲烷∶甲醇（1∶1)回流提取，浓缩，二氯甲烷萃取后，经液相色谱仪分离，在227nm处测定，按外标法计算含量。

仪器设备及实验条件：

仪器设备 A lltech 426 型高效液相色谱仪；200型紫外检测器；Alltech 外置工作站。

色谱条件色谱柱：A llt im a C18 5μ柱(5 mm×250 mm )；流动相：甲醇-水 (65∶35) ；流量：1.0ml/min；检测波长：227nm；进样量: 20μL；柱温：室温。

试样制备：

对照品溶液的制备

供试品溶液的制备将人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶子和皮于 40 ℃干燥后碾成粉末(过孔径为 0. 32 mm 的筛)，分别精确称取2.5g 于200 mL三角瓶中，用100mL甲醇-二氯甲烷(1∶1)混合溶剂浸泡24h，次日超声震荡提取30min，过滤，残渣用甲醇冲洗3次，合并滤液，30℃下减压浓缩，提取物用水(50mL×3)和正己烷(50mL×3)萃取，水层用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷萃取液，然后用活性炭(5 g)脱色，过滤，滤液于25℃ 下减压干燥，用甲醇 1mL溶解，0. 45μm 微孔滤膜过滤，分别配制好种子、枝条、叶和皮的样品制备液。

操作步骤：

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，依上述色谱条件测定，按外标法计算含量。

附件：

点击下载 (解压密码:www.med126.com)

备注：

参考文献：

李俊，牙启康，苏小建等.人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析.广西师范大学学报(自然科学版) .2005，23（2)：68～69

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