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小儿热速清颗粒——黄芩苷的含量——高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 小儿热速清颗粒——黄芩苷的含量——高效液相色谱法
方法名称:
小儿热速清颗粒——黄芩苷的含量——高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定小儿热速清颗粒中黄芩苷的含量。

本方法适用于小儿热速清颗粒中黄芩苷的含量测定。

方法原理:

用反相高效液相色谱法分析黄芩苷,在277nm处检测黄芩苷的吸收值,计算出其含量

试剂:

1. 甲醇(色谱纯)

2.乙醇(色谱纯)

3.磷酸(分析纯)

4. 二乙胺 (分析纯)
仪器设备:

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

色谱柱: Hypersil ODS (100 mm ×4. 6 mm ,5μm)。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相:甲醇 水 磷酸 = 47 53 0.2,流速:1.0 ml/min

2.2 检测波长:277nm

2.3柱温:30°C

试样制备:

1.供试品阴性对照溶液的制备

按处方量取除黄芩外其他各味药材,加入适量水煎煮60min ,煎液加入95 %乙醇直至不产生沉淀,过滤,取续滤液即得。

2.供试品溶液的制备

按处方量取加入适量水煎煮60min,煎液加入95 %乙醇直至不产生沉淀,过滤,取续滤液即得。

3.对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品7.3mg ,置于25ml 容量瓶中,加50 %甲醇至刻度,水浴加热溶解,冷却至室温,摇匀,即得黄芩苷对照液。

4. 标准溶液的制备

准确量取黄芩苷对照液0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml ,分别置于10ml 容量瓶中,用50 %甲醇定容,即得不同浓度梯度的黄芩苷工作液。
操作步骤:

1.标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定黄芩苷的响应值,以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液及阴性对照溶液分别进样20μ注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定黄芩苷的吸收值,计算出其含量。

参考文献:

周萍,曹臣,喻坚柏. 小儿热速清颗粒提取工艺的研究. 湖南中医杂志,2004,20(4):78-79

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