方法名称： |
益心酮滴丸—黄酮苷的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定益心酮滴丸中黄酮苷的含量。 本方法适用于中成药益心酮滴丸。 |
方法原理： |
供试品于容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，稀释，滤过，滤液注入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长330nm处检测牡荆素鼠李糖苷(SZ-1)，牡荆素葡萄糖苷(SZ-2)的吸收值，分别计算含量。 |
试剂： |
1.甲醇（色谱纯) 2.乙腈（色谱纯) 3.四氢呋喃 4.冰醋酸 |
仪器设备： |
1仪器 1.1高效液相色谱仪 1.2色谱柱 Agilent ZORBAX Extend-C18(4.6mm×250mm,5μm) 1.3紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相：四氢呋喃 ＋ 甲醇 乙腈 ＋ 水 ＋ 醋酸 = 30 3 4 120 3 2.2检测波长：330nm 2.3流速：1.0mL/min 2.4柱温：25℃ |
试样制备： |
1.称取供试品 精密称取益心酮滴丸20粒。 2.对照品溶液的制备 精密称取对照品牡荆素鼠李糖苷4.0mg，置100mL容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得0.04mg/mL的牡荆素鼠李糖苷对照品溶液；精密称取对照品牡荆素葡萄糖苷2.0mg，置100mL容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得0.02mg/mL的牡荆素鼠葡萄糖苷对照品溶液。 3.供试品溶液的制备 将供试品置于100mL容量瓶中，加50%甲醇适量，待溶解后，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置于50mL量瓶中加50%甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线绘制 精密吸取五个不同浓度的牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，以峰面积积分值分别对牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的浓度进行回归，绘制标准曲线。 2.供试品溶液的测定 精密吸取上述供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长330nm处分别测定牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的峰面积积分值，用外标法计算出牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的含量。 |
参考文献： |
苏娟，张卫东，周耘，等.HPLC测定益心酮滴丸中的黄酮苷.中国中药杂志，2004，29(6):525-527 |
