桂枝茯苓丸—肉桂酸的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定桂枝茯苓丸中肉桂酸的含量。

本方法适用于中成药桂枝茯苓丸。

供试品置具塞锥形瓶中，加入甲醇超声提取，放冷，摇匀，滤过，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长285nm处检测肉桂酸的吸收值，计算出其含量。

1.乙腈（色谱纯)

2.磷酸

1仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

Kromasil-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm)

1.3 紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1流动相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 30 70

2.2检测波长：285nm

2.3柱温：室温

2.4流速：1.0mL/min

1.称取供试品

取桂枝茯苓丸10g，切碎，精密称定。

2.对照品溶液的制备

精密称取肉桂酸对照品10mg精密称定，置100mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀释到刻度，摇匀，精密量取5mL，置100mL棕色量瓶中加50%甲醇稀释到刻度，摇匀，即得5μg/mL的肉桂酸对照品溶液。

3.标准溶液的制备

精密吸取1.0，3.0，5.0，7.0，9.0mL(0.1mg/mL)的肉桂酸对照品溶液分别置100mL棕色瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，称定重量，超声处理30min，放置室温后，称重，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，收集续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线绘制

精密吸取5.3项下的系列浓度标准溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长285nm处测定肉桂酸的峰面积积分值，以峰面积积分值对浓度进行回归，绘制标准曲线。

2.样品测定

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长285nm处测定肉桂酸的峰面积积分值，用外标法计算出肉桂酸的含量。