方法名称： |
五味香连丸—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法适用于中成药五味香连丸。 |
方法原理： |
供试品于具塞锥形瓶中，加甲醇加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解后，滤过，滤液注入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
甲醇（色谱纯) |
仪器设备： |
1仪器 1.1高效液相色谱仪 1.2色谱柱 SinoChromODS-AP(4.6mm×150mm,5μm) 1.3紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相：甲醇 0.05mol/L磷酸二氢钾 = 28 72 2.2检测波长：254nm 2.3流速：1.0mL/min |
试样制备： |
1.称取供试品 取五味香连丸100粒，研细，精密称取1g。 2.对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品适量加甲醇制成60μg/mL的盐酸小檗碱对照品溶液。 3.供试品溶液的制备 将供试品置具塞锥形瓶中，加甲醇50mL，加热回流1h，滤过，洗涤容器及残渣，合并 滤液和洗液，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，定量转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线绘制 精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液2、5、7.5、10、12.5、15μL，注入高效液相色谱仪，以峰面积积分值对盐酸小檗碱的量进行回归，绘制标准曲线。 2.供试品溶液的测定 精密吸取上述供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定盐酸小檗碱的峰面积积分值，用外标法计算出小檗碱的含量。 |
参考文献： |
肖慧，钟瑜.HPLC法测定五味香连丸钟盐酸小檗碱的含量.广东药学院学报，2004，20(6):597-598 |
