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肿节风片—肿节风片总黄酮的测定—分光光度法

医药数据库中心 药学论坛 肿节风片—肿节风片总黄酮的测定—分光光度法
方法名称:
肿节风片—肿节风片总黄酮的测定—分光光度法
应用范围:

本方法采用分光光度法测定肿节风片总黄酮(以芦丁计算)的含量。

本方法适用于中药制剂肿节风片。

方法原理:

供试品置量瓶中,加水超声处理使溶解,溶液加乙醇(含醇量达70%)沉淀,上清液作为供试液,置紫外可见分光光度计, 于波长500nm处测定吸收度,按芦丁的吸收系数计算总黄酮含量。

试剂:

1. 乙醇

2. 亚硝酸钠

3. 10%硝酸铝

仪器设备:

紫外可见分光光度计

试样制备:

1. 对照品溶液的制备

精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品110mg,置100mL量瓶中,加60%乙醇70mL使溶解,放置室温,加60%乙醇至刻度,摇匀。精密吸取上述溶液10mL,置50mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,作为对照品储备液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取供试品去糖衣后研细的粉末(过五号筛—80目)1g,置100mL量瓶中,加水90mL超声处理20min,放置室温,加水至刻度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液15mL,置50mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,滤过,滤液作为供试品储备液。

精密量取上述供试品溶液2.0mL,置25mL量瓶中,加5%亚硝酸钠溶液1mL,摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置15min,作为供试品测定液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一,“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

1. 标准曲线绘制

精密吸取对照品储备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0和6.0mL,分别置25mL量瓶中,各加水至6mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL,摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置15min,照分光光度法,于波长500nm处测定吸收度,以浓度对吸收度绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

2. 供试品的测定

供试品测定液照分光光度法,于波长500nm处测定吸收度,计算含量。

注:分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照,采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长,一般供试品的吸收度读数,以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择,应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收,因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数,再计算含量。

参考文献:

吕武清,吴朝阳,吴丽萍. 肿节风片的质量标准研究. 中国现代应用药学杂志,2000,17(2):136-138.

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