方法名称： |
复方丹参片－丹参酮ⅡA的测定－薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法适用于中药制剂复方丹参片。 |
方法原理： |
供试品于索氏提取器中经氯仿加热回流，过滤，滤液浓缩加氯仿定容，制成供试液，点样、展开，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λS=265nm，λR=378nm测量丹参酮ⅡA吸收度积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 氯仿 2. 甲醇 3. 苯 |
仪器设备： |
1. 仪器 1.1 索氏提取器 1.2 薄层扫描仪 1.3点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.5展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 2.材料 高效硅胶G板。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品适量，加氯仿制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 精密称取供试品5g粉碎，置索氏提取器中，加氯仿适量，加热回流提取至无色，提取液浓缩加氯仿定容至2mL量瓶中，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.点样 精密吸取供试品溶液10μL、对照品溶液4μL与8μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 2.展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以苯-甲醇（9:1)为展开剂，展开至15cm时，取出薄层板，晾干。 3. 标准曲线绘制 精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5μL点样，展开显色后，扫描测定，以点样量对积分面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 4.含量测定 在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λS =265nm，λR=378nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正 |
参考文献： |
伍少雄，黄相兰. 复方丹参片中丹参酮ⅡA的薄层扫描法测定. 时珍国药研究，1997，8（5)：415-416. |
