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氢化可的松的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 氢化可的松的测定—高效液相色谱法
方法名称:
氢化可的松的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定氢化可的松的含量。

本方法适用氢化可的松。

方法原理:

供试品和内标均制成甲醇溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长240nm处检测氢化可的松(C21H30O5)和内标炔诺酮的吸收值,计算出其含量。

试剂:

甲醇

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论板数按氢化可的松峰计算应不低于 2000。氢化可的松峰与内标物质峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:水 甲醇= 30 70

2.2 检测波长:240nm

2.3 柱温:室温

试样制备:

1. 称取供试品

取本品适量,精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取氢化可的松对照品适量,加甲醇溶解并稀释成每1mL中约含0.5mg的溶液。

3. 内标溶液的制备

取炔诺酮适量,加稀甲醇制成每1mL中约含有0.40mg的溶液,即得。

4. 供试品溶液的制备

上述供试品加稀甲醇溶解并定量稀释成每1mL中约含0.5mg的溶液,即得供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

分别精密吸取上述供试品溶液与内标溶液5mL,置25mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混合均匀,取10μL 注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长240nm处测定氢化可的松和内标炔诺酮的吸收值,按内标法以峰面积计算,即得。氢化可的松对照品溶液,同法测定。

参考文献:

中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.402。

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