咪康唑氯倍他索乳膏—硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定咪康唑氯倍他索乳膏中硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量。

本方法适用咪康唑氯倍他索乳膏。

将供试品内精密加入内标溶液，经水浴搅拌溶解，于冰水中冷却使基质凝固，滤过，再向基质中加甲醇，滤液置于50mL量瓶中并加甲醇稀释至刻度，冷冻2小时以上，快速过滤后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长240nm处检测硝酸咪康唑（C₁₈H₁₄Cl₄N₂O·HNO₃)和丙酸氯倍他索（C₂₅H₃₂ClFO₅)和内标邻苯二酸二丁酯的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇

2.乙腈

3. 0.5%醋酸铵

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按咪康唑氯倍他索峰计算应不低于 2000。硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索峰与内标峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.5%醋酸铵 乙腈 甲醇= 24 38 38

2.2 检测波长：240nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取本品2.5g，精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取丙酸氯倍他索对照品12.5mg，置20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为丙酸氯倍他索对照品溶液；

精密称取硝酸咪康唑对照品50mg，置50mL量瓶中，精密加入丙酸氯倍他索对照品溶液2mL与内标溶液1mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

3. 内标溶液的制备

取邻苯二酸二丁酯0.4mL，加甲醇稀释至100mL，摇匀，即得。

4. 供试品溶液的制备

上述供试品置烧杯中，精密加入内标溶液1mL，加甲醇20mL，置80℃水浴加热搅拌使溶解，在冰水中冷却，待基质凝固后，滤过，于基质中再加甲醇15mL、10mL重复提取二次，合并三次滤液在同一50mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，置水浴中冷却2小时以上，取出后迅速过滤，放至室温，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液的续滤液20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长240nm处测定硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索及内标邻苯二酸二丁酯的吸收值，按内标法以峰面积分别计算硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量，即得。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p394。