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医学免费论文:血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)研究进展
【关键词】 血管性血友病因子裂解酶; 血栓形成 ; 炎症
近年研究表明：血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)对血栓形成有重要作用。ADAMTS-13最初是在对血栓性血小板减少性紫癜[ 6][10](TTP)的研究中发现。TTP是一种罕见的微血管病变，特征表现有溶血性贫血，血栓形成，肾功能衰竭与发热，而通过对家族及遗传性TTP的研究发现：在急性TTP患者体内缺少足量的ADAMTS13，在TTP患者体内也发现了抑制ADAMTS-13的自身抗体，而在儿童中发病的溶血尿素综合征同样有ADAMTS-13的缺乏，因此发现这类疾病与ADAMTS-13的缺乏和抑制有关。随着对TTP的深入认识，目前已从正常人血浆中提纯出一种特定的大分子量，能被金属离子钙和钡所激活的ADAMTS-13。
1 ADAMTS-13的基础研究
1.1 分离纯化 Barbara Plaimauer[1]在HEK293细胞中完整的克隆了ADAMTS-13的cDNA序列，重组的ADAMTS-13与血浆中的ADAMTS13一致。Levy Soejima 等用Northern印迹法在肝脏内发现了ADAMTS-13，因此认定肝脏是ADAMTS-13的合成部位，而Plaimauer[11] 发现ADAMTS-13不局限于肝脏，心脏，脑，肾等器官也可以合成ADAMTS-13，尽管量较少，研究还发现重组的ADAMTS-13对vWF的降解作用可被TTP患者血浆中以及合成的IgG抗体所抑制，充分说明TTP患者血浆中存在抑制ADAMTS-13的抗体.另外ADAMTS-13的合成受雌激素的影响较大.
1.2 生物结构及生物学活性[2] [3] 人的ADAMTS-13基因位于9号染色体长臂，全长37kb，由29个外显子组成，开放阅读框为4284bp,由1427个氨基酸残基组成并含有一个信号肽，一个含有41个氨基酸残基的短前肽，一个reprolysin样金属酶结构域，一个disintegrin样结构域，一个凝血酶敏感蛋白酶-1重复序列，一个富含半胱氨酸结构域，一个ADAMTS间隔区，七个附加的凝血酶敏感蛋白-1重复序列，两个CUB结构域。在pH值为8～9且有一定剪切力作用于受试血浆时，在低离子强度物质尿素和胍的参与下，vWF超大型多聚体由纱织球状展开为丝状，842位酪氨酸残基和843位蛋氨酸残基间的裂解部位暴露，从而被ADAMTS-13裂解产生分子量为140Kda和176Kda的两个片段。这种裂解作用可被EDTA 和EGTA所抑制。不同物质对ADAMTS-13活性影响不同。螯合剂可强烈抑制此酶的活性，N乙基马来酰亚胺的抑制作用较慢。在人体内可以找到同样的裂解片断证明酶在正常人血浆中也有作用医.学全.在.线网站www.med126.com。
1.3 系统性抗凝作用 Anlik chauhan等[4] 通过显微镜比较观察在灌注A23187之后ADAMTS-13-/-小鼠及ADAMTS-13+/+小鼠血管内血栓形成发现ADAMTS-13+/+小鼠血管内只有少量血小板聚集，但无血栓形成，而ADAMTS-13-/-小鼠血管内有血栓形成且持续45s到2min，而相同条件下分别注入ADAMTS-13抗体ADAMTS-13+/+小鼠和ADAMTS-13-/-小鼠血管内均可见更多的血小板粘附，但ADAMTS-13+/+小鼠血小板链长度明显短于ADAMTS-13-/-小鼠，灌注ADAMTS-13拮抗剂，ADAMTS-13 -/-小鼠仍有微血栓形成，ADAMTS-13+/+小鼠血管内只有血小板与内皮细胞粘附，无微血栓形成。ADAMTS-13对血小板黏附与内皮细胞及内皮细胞下均有负向调节作用，ADAMTS-13可以延缓血栓形成，可以调节血小板间的相互作用，清除血小板链，缺乏ADAMTS-13时，炎症，变态反应甚至血小板活化都会诱发TTP。
