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1.6 血清CORT测定 每组大鼠接受急性应激后2?h[7]?断头处死，取血，3?000?r/min离心10?min，取上清，放射免疫分析法测定血清皮质醇含量。皮质酮含量由皮质醇测定值换算得来，换算公式：血清皮质酮浓度=血清皮质醇浓度×50(原理：皮质酮是啮齿类动物主要的糖皮质激素，大鼠血清皮质酮含量与皮质醇含量比恒定，约为50∶1)
1.7 Western blot检测iNOS蛋白表达 动物断头处死后，在冰面上剥离大鼠海马组织，置-80?℃保存。将组织按比例加入裂解液RIPA(50?mmol Tris, 150?mmol NaCL, 0.1% SDS, EDTA等)和PMSF的混合液，匀浆，4?℃，12?000?r/min 离心10?min,离心半径为9.13?cm,留取上清液。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定蛋白浓度。按每孔25?μg蛋白上样行SDSPAGE凝胶电泳，蛋白转移到PVDF膜上，用5%脱脂牛奶室温封闭1?h，加入兔抗iNOS多克隆抗体(1∶800),4?℃孵育过夜。辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(1∶10?000)室温孵育1?h, 洗膜3次后，加ECL暗室曝光1～5?min，显色条带用Scion Image软件进行灰度分析。以βactin作为内参，目的蛋白条带与βactin条带灰度值比值代表目的蛋白相对表达量。
1.8 统计学处理 采用SPSS13.0软件行单因素方差分析及Sigmaplot10.0画图。数据以±s表示，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果医.学.全.在.线www.med126.com
2.1 旷场实验结果 21?d CUMS造模结束后，与对照组比较，CUMS组中央格停留时间延长，竖立次数减少(P<0.05)，水平穿越格数明显减少(P<0.01);普萘洛尔组水平穿越格数、竖立次数和清洁运动次数减少(P<0.05);哌唑嗪组与对照组各指标之间差异无统计学意义。与CUMS组比较，普萘洛尔组修饰次数减少(P<0.05)，水平穿越格数、竖立次数增加，中央格停留时间和粪便颗粒数减少，但差异无统计学意义;哌唑嗪组中央格停留时间减少，竖立次数增加(P<0.05)，水平穿越格数明显增加(P<0.01)。普萘洛尔组与哌唑嗪组比较，水平穿越格数、竖立次数和修饰次数减少(P<0.05)。见表1。中央格停留(t/s)穿越格数竖立次数修饰次数粪便粒数对照组
2.2 血清皮质酮测定结果 与对照组比较，CUMS组和普萘洛尔组CORT水平呈下降趋势，哌唑嗪组CORT水平呈上升趋势，但差异均无统计学意义。普萘洛尔组血清CORT水平显著低于哌唑嗪组(P<0.05)。
