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MS-PCR方法是由Herman等[12]于1996年首创，该方法利用了PCR灵敏、快速、简便的特点，已经成为当前检测DNA甲基化的最常用方法之一。MSP技术检测基因甲基化状态敏感度高，并且可以避免限制性酶切不全所带来的假阳性结果，能同时检测多个CpG位点的甲基化情况，是研究基因甲基化的较为实用的技术。而MSP结合测序方法不仅能明确甲基化的确切位置和甲基化程度，而且更敏感，需要的DNA少，能用于少量DNA的甲基化分析，因而给甲基化检测提供方便。Estelle等[13]曾尝试应用MS-PCR法，取随机人群的血清、尿液、气管分泌液、淋巴结组织活检标本做基因甲基化检查，结果具有早期诊断意义，部分病例在肿瘤确诊之前就已经明确报告甲基化阳性。本实验结果表明，乳腺癌组织较正常乳腺组织ERα基因启动子A、B区甲基化率显著增高，ERα阴性乳腺癌组的ERα启动子A、B区甲基化率较ERα阳性乳腺癌组的均显著增加，ERα启动子A、B区甲基化与ER蛋白表达均呈显著的负相关。因此，ERα启动子A、B区的甲基化状态不仅可以早期预测乳腺组织有无恶性变化的可能，而且对于ERα阳性乳腺癌，可以在ERα向阴性转变之前发现恶性肿瘤复发的可能。乳腺癌细胞系的研究表明，去甲基化药物可以使乳腺癌细胞的ER恢复表达，恢复对抗雌激素疗法的敏感性，从而提高乳腺癌内分泌治疗的有效率[14]。因此，ER启动子区CpG岛的甲基化状况可以作为去甲基化治疗的指征，依据患者甲基化的检测结果，可以进行去甲基化治疗，使ER转阳，提高内分泌治疗有效率。由于近年来，应用DNA甲基化标志进行临床癌症检测和诊断已经取得了显著的进展。总之，检测ERα启动子区的甲基化状态，因其具有高灵敏度，操作简便，快速，检测标本要求低等特点，可以作为乳腺癌早期诊断、分型、复发的生物学指标，选择内分泌治疗的预测因子以及提高内分泌治疗有效率的方法医.学全.在.线网站www.med126.com。
本研究结果显示，ERα启动子甲基化率与乳腺癌淋巴结转移与否无显著相关，提示ER基因甲基化与乳腺癌的转移潜能无关。本研究结果在12例ER表达阴性的乳腺癌中，分别有4例、5例未检测到ERα启动子A区、B区甲基化，提示ERα失表达还可能与其他位点甲基化有关，或者还有其他一些机制参与，DNA甲基化并不是其蛋白失表达的唯一机制，而是多种机制共同参与的结果。
【参考文献】
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