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2.9 回收率测定
精密量取已知5-HMF限量的同一批己酮可可碱葡萄糖注射液1 ml，共9份，分别精密加入5-HMF标准储备液10 μl、20 μl、30 μl，摇匀。各取上述溶液10 μl，分别注入色谱仪，记录色谱图，计算回收率（见表1)。表1 加样回收率试验结果（略)
2.10 样品的测定
2.10.1 样品中5-HMF的限度确定
根据中国药典2005版二部葡萄糖注射液检查项下对5-HMF的限度要求，取5-HMF对照品适量，加水制成在284 nm吸收度为0.32的溶液，照上述测定方法测定，代入标准曲线计算浓度和含量，计算结果5-HMF含量为12.5 μg/ml。故样品中5-HMF的限量应为12.5 μg/ml。
2.10.2 样品中5-HMF的含量测定
精密量取己酮可可碱葡萄糖注射液样品10 μl注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件，记录色谱图至主分峰保留时间的2倍，测得5-HMF的色谱峰面积 另精密量取5-HMF标准储备液1.25 ml置50 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，药匀，得浓度为12.5 μg/ml的对照品溶液。精密取10 μl注入高效液相色谱仪中，同法测定峰面积，除空白溶液峰和其他杂质峰外医学全.在.线www.med126.com，按峰面积外标法计算(见表2)。表2 样品测定结果（略)
3 结论
对于以葡萄糖为载体的输液剂，国内外药典多采用284 nm测定吸收度的方法控制产品中5-HMF量，浓度不同，吸收度的限度不同。紫外分光光度法因简单、通用、无需对照品而作为首选方法。但本品主药己酮可可碱对检测有干扰，故采用HPLC外标法，按照中国药典中葡萄糖注射液限度要求，用对照品进行限度等量转换试验，以确定合适的5-HMF限量。
本文建立的HPLC法测定己酮可可碱葡萄糖注射5-HMF的限量准确性高、灵敏度及重现性好，是控制己酮可可碱葡萄糖注射液中5-HMF限量的行之有效的方法。
【参考文献】[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(II)部[S].北京：化学工业出版社，2005:692.
