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公共卫生医学论文辛伐他汀内皮细胞VEGF和Ang-2表达的作用及其机制的分析
1 引言
糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy, DR)是严重的致盲性眼病，其发病机制目前尚未完全明了。最近，线粒体活性氧（reactive oxygen species ,ROS)在血管内皮细胞损伤中的作用受到关注。高血糖诱导线粒体ROS生成增加，引起DNA损伤，使得DNA修复酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly-(ADP-ribose) polymerase, PARP)过度激活，通过裂解底物ＮＡＤ+生成大量的(ＡＤＰ-核糖)聚合物（poly(ADP-ribose)，PAR )和尼克酸, 大量的PAR积聚在3-磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)等周围，使其发生ＡＤＰ-核糖基化。GAPDH核糖基化后活性受到抑制，从而触发信号级联放大，引起山梨醇的聚积、AGEs 的形成、PKC 的激活和氨基己糖途径活性增强, 导致血管内皮细胞损伤，最终发生终末器官的损害。这是班廷奖得主Brownlee教授新近提出的糖尿病并发症发病的统一机制学说的主要内容。因此，线粒体ROS成为DR有效防治的重要靶点。医.学.全.在.线网站提供。
他汀类药物是3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG－CoA)还原酶抑制剂，HMG－CoA还原酶是胆固醇合成酶系中的限速酶，通过对此酶的抑制，此类药物可阻断细胞内甲羟戊酸代谢途径，竞争性抑制胆固醇的生物合成，使细胞内胆固醇减少等，从而发挥其降血脂作用。近年来发现他汀类药物还具有不依赖于其降脂效果的多样性的保护作用,包括抗氧化应激作用。本文旨在探讨辛伐他汀对高糖诱导下牛视网膜血管内皮细胞(retinal bovine retinal endothelial cell,BREC) 血管内皮生长因子（vascμlar endothelial growth factor, VEGF)和血管生成素-2（Angiopoietin-2, Ang-2)表达的作用，并阐明其作用机制。
2 材料和方法
2.1 牛视网膜微血管内皮细胞培养BREC培养
采用选择性培养方法，具体培养及鉴定方法参见以往。主要步骤：牛眼（上海清真食品公司屠宰场提供)冰上运输，2 h内处理。清除眼外肌和筋膜，消毒碘和庆大霉素溶液浸泡眼球。自角膜缘后约3 mm处剪除眼前段，去除玻璃体，无菌取出视网膜置于盛有冰D-Hanks液的平皿内，解剖镜下清洗去除残留的可见色素，剪除可见大血管并剪碎视网膜。4℃，1,800 rpm离心5min。弃除上清液，加入5倍体积含有0.05%胶原酶和0.025% BSA的PBS，5% CO2培养箱内37 ℃孵育45min，再经网孔88 μm不锈钢筛1 引言糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy, DR)是严重的致盲性眼病，其发病机制目前尚未完全明了。最近，线粒体活性氧（reactive oxygen species ,ROS)在血管内皮细胞损伤中的作用受到关注。高血糖诱导线粒体ROS生成增加，引起DNA损伤，使得DNA修复酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly-(ADP-ribose) polymerase, PARP)过度激活，通过裂解底物ＮＡＤ+生成大量的(ＡＤＰ-核糖)聚合物（poly(ADP-ribose)，PAR )和尼克酸, 大量的PAR积聚在3-磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)等周围，使其发生ＡＤＰ-核糖基化。GAPDH核糖基化后活性受到抑制，从而触发信号级联放大，引起山梨醇的聚积、AGEs 的形成、PKC 的激活和氨基己糖途径活性增强, 导致血管内皮细胞损伤，最终发生终末器官的损害[1，2]。这是班廷奖得主Brownlee教授新近提出的糖尿病并发症发病的统一机制学说的主要内容[3]。因此，线粒体ROS成为DR有效防治的重要靶点。
