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生理学-实验讲稿:2-1动物实验基本操作

生理学:实验讲稿 2-1动物实验基本操作:动物实验基本操作目的和原理 生理实验中经常用蟾蜍作为实验对象,本实验目的熟悉蟾蜍坐骨神经一腓肠肌标本的制备。 实验对象 蟾蜍实验器材和药品 类手术器械一套、棉线、烧杯、滴管、任氏液。 实验项目坐骨神经腓肠肌标本制备(一)破坏脊髓左手握住蟾蜍,用食指下压口吻端使头前俯(图1),右手持脑脊髓穿刺针从枕骨大孔垂直刺入,再向前刺入颅腔,左右搅动捣毁脑组织;然后将针退至皮下,再将针尖向后刺入脊髓

动物实验基本操作

目的和原理  生理实验中经常用蟾蜍作为实验对象,本实验目的熟悉蟾蜍坐骨神经一腓肠肌标本的制备。

 实验对象  蟾蜍

 实验器材和药品  类手术器械一套、棉线、烧杯、滴管、任氏液。

 实验项目

 坐骨神经腓肠肌标本制备

 (一)破坏脊髓左手握住蟾蜍,用食指下压口吻端使头前俯(图1),右手持脑脊髓穿刺针从枕骨大孔垂直刺入,再向前刺入颅腔,左右搅动捣毁脑组织;然后将针退至皮下,再将针尖向后刺入脊髓管捣毁脊髓。若蟾蜍四肢肌肉松软,呼吸消失表示脊髓已破坏完全。否则,按上述方法再行破坏。

图1  破坏蟾蜍脑脊髓的图示

 

(二)剪除躯干上部及内脏  先用手确定骶髂关节的体表投影,然后左手握住脊柱下端,右手持粗剪刀在骶髂关节水平以上2~3cm处剪断脊柱,此时蟾蜍头与内脏自然下垂。沿脊柱两侧剪开侧腹壁至大腿根部,剪除全部下垂的头及内脏(注意勿损伤脊柱两侧的坐骨神经)(图2);也可先用剪刀在前肢水平后方,环形剪开皮肤,然后用镊子夹住,将后半身皮肤全部剥去,再剪除躯干上部及内脏 。

 


图2  剪除躯干上部及内脏

(三)剥皮  注意保护脊柱两侧的坐骨神经束。用左手持大镊子夹住脊柱的断端(不要握夹住坐骨神经)。右手捏住背面皮肤边缘,向下剥掉全部后肢的皮肤(图3)。将标本放入盛有任氏液的烧杯中。

 

 

 

 

 

 

 

图3  剥www.med126.com掉后肢皮肤

(四)将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净,再进行下述步骤。

(五)分离两腿  将已剥皮的下肢标本放在蛙盘上, 用粗剪刀将腹侧耻骨联合及背侧骶骨突起的部位剪平,沿正中线将两侧大腿分离(注意不可剪歪。以防损伤坐骨神经)。

(六)制作坐骨神经腓肠肌标本  取一只腿腹侧向上固定于蛙盘上。

1.游离坐骨神经  用玻璃针沿脊柱侧将坐骨神经根游离。将标本背侧向上固定。用玻璃针在大腿背侧循坐骨神经沟(股二头肌和半膜肌之间的裂隙中)找到坐骨神经后分离清楚,用玻璃针在大腿根部沿神经的走行穿至腹侧,在确认玻璃针上面无坐骨神经后,用小剪刀将玻璃针上面的肌肉及结缔组织剪断暴露出整根坐骨神经。 再用粗剪刀在坐骨神经根部保留神经发出部的约1厘米脊柱剪去其余部分,将坐骨神经游离。用大镊子提起坐骨神经所连的脊柱块,用小剪刀剪药品数据断坐骨神经上的小分支将神经干游离至腘窝。    

 2.完成坐骨神经-腓肠肌标本  分离腓肠肌跟踺,用线结扎,并在结扎线的远侧剪断跟腱将腓肠肌游离至腘窝处。将游离干净的坐骨神经搭在腓肠肌上。在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀将股骨下端刮干净。在膝关节以上1厘米处剪断股骨。再在膝下剪去胫骨。此时即完成坐骨神经-腓肠肌标本的制作。用浸有任氏液的铜弓迅速接触坐骨神经,如腓肠肌有快速收缩,表明标本兴奋性良好。 将制备好的标本放入盛有任氏液的烧杯中,待其兴奋性稳定后再进行实验。

 注意事项

1.尽量用器械操作,忌用金属器械触、夹神经。

 2.操作过程中防止过度牵拉神经。

 3.用任氏液保持神经湿润。

 

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