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微生物培养基手册大全

来源:本站原创 更新:2010-10-23 医学检验网
微生物培养基种类大全:

1、营养琼脂(普通琼脂)
成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升
   琼脂(视天气,琼脂质量而定)
制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。

2、血琼脂平板(BA)
制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。
   2.尿液,脓液
   3.分离细菌标本用。

3、基础培养基 (肉膏汤BB)
成份:蛋白胨 10克     牛肉膏 5克
   氯化钠 5克     水     1000毫升
制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
   2 作普通琼脂斜面。

4、血液培养基(大管肉汤培养基)
成份:1 新鲜牛肉浸液 1000毫升
   2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升
   3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升]    49.3% 1毫升
   4 枸椽酸钠                      0.3g
制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
   2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。

5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)
成份: 蛋白胨 10克       乳糖     10克
       氯化钠 5克       琼脂     25(22)克
       水    1000毫升     2%伊红溶液20毫升
       0.5%美兰溶液 20毫升
制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)

用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
                         1

6、罗文斯坦培养基
成份:磷酸二氢钾     2.4克       硫酸镁 0.24克
   枸椽酸钠    0.6克       天门冬素 3.6克
   纯甘油(丙三醇) 12毫升       水     600毫升
   马铃薯粉    30克           鸡蛋 1000毫升(约3公斤)
   2%孔绿水溶液 20毫升   
制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。
   2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。
   3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。
   4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。
质控标准: 1 灭菌试验合格。
         2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。
用途:作结核分枝杆菌培养用。

7、结核半固体培养基
成份:磷酸氢二钠    19克           硫酸镁     0.6克
   磷酸二氢钾    2.5克       天门冬素 5克
   1%孔雀绿    1.5克           甘油    20毫升
   吐温80(10%) 5毫升           水    1000毫升
   枸椽酸钠       2.5克           动物血清 100毫升
   琼脂           1.5克(80小时用甲醇去脂)
   1%孔雀绿    0.78毫升    吐温80(10%) 5毫升
   加动物血清     100毫升
制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。2
   2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。
   3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。
   4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。
质控标准:1无菌实验合格。www.med126.com
      2琼脂硬度合适而清亮。
      3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。
用途:培养结核杆菌用。

8、亚碲酸钾血琼脂平板
成份:琼脂基础 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升
   1%亚碲酸钾 4.5毫升    绵羊血    10毫升
制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。
   2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。
质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。
用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。   
                    
9、米培养基
成份:白米    20克           水     1000毫升
   琼脂    20克       吐温80 10毫升
制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。
   2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。
   3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。
质控标准:1灭菌。
      2要求清亮。
      3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。
用途:培养白色念珠菌用。

10、蛋白胨水培养基
成份:蛋白胨 1克    氯化钠     0.5克
   水加至 100毫升     PH调至     7.8
制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。
质控标准:1 放置37℃无菌生长。
      2 接种大肠杆菌24小时生长良好。
      3 可作中国兰平板基础液。
      可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。

11、血培养基
成份:蛋白胨 10克           牛肉膏     5克
   氯化钠 5克           葡萄糖     3克
   枸椽酸钠 3克           MgSO4。7H2O 20毫升
   0.5%PABA 10毫升     酵母浸液 10毫升 0.2克(2%过滤)
   *酚红0.4% 6毫升    水     1000毫升
       琼脂     0.5克   
*:作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂。
制法:1、除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.4
   2、调好PH后再加酚红。
   3、硫酸镁、PABA另外无菌再加入(亚细,小BB)

12、沙氏培养基
成份:蛋白胨     1克                       水     100毫升
   琼脂     1.5克(琼脂粉1克%)     葡萄糖或麦芽糖 4克
                       
制法:1将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH即有5左右)分中号试管(约4毫升)包扎,高压115℃20分钟。
   2 趁热斜好,凝固备用。
质控标准:1无菌试验合格。
      2接种霉菌比在其它培养基上生长良好,其它菌生长不好。
用途:作分离培养霉菌用。
注意:1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12.5%氯霉素沙氏斜面培养基上。
   2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。

13、肉渣培养基
成份: 牛肉渣       牛肉浸液(牛肉膏)
制法:将做牛肉浸液的牛肉渣,装入试管,高约3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏汤(PH7.6)约5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高约0.5厘米(不加也可),121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用 。
用途:用于厌氧菌培养。
注意:如无肉渣也可用牛、羊血等代替,将血块先放入水内煮沸,取出成小块,血块在加热后摇匀成碎颗粒状。

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