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第一节 放射免疫分析

一、原理

（一）基本原理

放射免疫分析（RIA）的基础是放射性核素标记的抗原(radionuclide labeled antigen)和非标记抗原(unlabeled antigen)（标准抗原或被测抗原）同时与限量的特异性抗体(specific antibody)进行竞争性免疫结合反应(competitive immune binding reaction)，其竞争关系可用下式表示： 

         Ag  +  Ab  Ag-Ab + Ag

                  +

                *Ag              

             *Ag + *Ag-Ab

式中：*Ag为标记抗原，Ag为非标记抗原，Ab为特异性抗体，*Ag-Ab为标记抗原抗体复合物，Ag-Ab为非标记抗原抗体复合物。

由于*Ag与Ag的免疫活性完全相同，对Ab具有同样的亲和力，当*Ag和Ab为恒定量，Ag和*Ag的总量大于Ab上的有效结合点时，*Ag-Ab的形成是随着Ag量的增加而减少，剩下来的未结合或游离的*Ag则随着Ag量的增加而增加，称为竞争结合反应(competitive binding reaction)，因此测定*Ag-Ab或*Ag即可推出被测的Ag量（图13-1）。 

图13-1  放射免疫分析原理示意图 

（二）标准曲线

配制一系列已知浓度的标准抗原，分别向其中加入固定量的标记抗原和抗体，反应平衡后，分离抗原的结合部分和游离部分，测定*Ag-Ab的放射性B或游离*Ag的放射性F，计算出结合率B%［ B /（B+F）× 100%］或其他指标，如B/B₀%（B₀表示不含非标记抗原管的最大结合放射性）。以B%或B/B₀%为纵座标，标准抗原的浓度为横座标，绘制曲线即为标准曲线(standard curve)（图13-2）。

依同法测得被测样品的B%或B/B₀%，即可从此标准曲线上查出样品中被测抗原的浓度。  

图13-2  标准曲线