药理学实验研究中实验动物的选择与应用

　　（六）作用于胆碱受体和肾上腺素受体的药物实验

　　胆碱受体有M和N两种，当M受体兴奋时，表现为心率减慢，心收缩力减弱，血压下降，胃肠道平滑肌收缩，瞳孔缩小，唾液分泌增加，支气管平滑肌收缩等，已知典型的M受体阻滞药阿托品等能阻滞上述作用。欲确定一个未知药是否作用于M胆碱受体，其作用性质是兴奋、抑制或阻断，可选离体豚鼠回肠、兔的瞳孔、兔的唾液腺分泌、大鼠或猫的血压、离体蛙心和离体兔右心房等实验，与已知药匹鲁卡品或阿托品对照，即可获得明确结论。N-胆碱受体分为N₁和N₂两种。N₁胆碱受体兴奋时，植物神经节兴奋及肾上腺髓质分泌。在阿托品化猫，凡不具有血管收缩作用而能使血压升高的药物，初步可认为其作用部位在N1胆碱受体。N2胆碱受体兴奋时骨骼肌收缩，可采用水蛭背肌或蛙腹直肌标本实验，即能得到结果。医学全在.线提供

　　二苯羟乙酸奎宁酯（Quinuclidiny1Benzilate,QNB）是一个M-受体阻滞药，它能与M-胆碱受体紧密结合，维持时间较长，为研究M-胆碱受体提供了一个有效的工具。节后拟胆碱药或节后抗胆碱药都能与M-胆碱受体结合，因此均可降低³H-QNB的结合率。常选用豚鼠的回肠作此实验。此外，还可选用豚鼠的心脏、肺脏、脑及脾脏，这些组织匀浆均具有与³H-QNB结合的M-胆碱受体。但在肝脏、肾脏及隔肌则不存在与³H-QNB结合的M受体。

　　肾上腺素受体有α和β两种，当α受体兴奋时，表现为皮肤、粘膜及内脏压管收缩，胃肠道平滑肌松弛，瞳孔散大，瞬膜收缩，子宫收缩等。已知典型的α受体阻滞药酚妥拉明和妥拉苏林等能阻断上述作用。常选用离体兔主动脉条、离体豚鼠或大鼠输精管、离体猫脾条、离体大白鼠胃底条、离体兔空肠等作α受体作用实验。β受体兴奋时，表现为心率加快，心收缩力加强，传导加速，骨骼肌血管和冠状动脉扩张，胃肠道平滑机松弛，支气管扩张，糖原和脂肪分解等。由于β受体又分β₁、β₂两种，对于这两种亚型受体作用的观察，一般是以心脏效应作为观察β₁受体作用，而以气管、支气管效应作为观察β₂受体作用。已知典型的β受体阻滞药心得安等能阻断上述作用。常选用离体蛙心、离体原位蛙心排出量、兔心灌注、在位猫（或兔）心实验、兔（豚鼠）离体心房实验、离体大白鼠子宫、离体豚鼠气管片等作β受体作用实验。

　　未妊娠兔的离体子宫对α受体兴奋药十分敏感，可使之强烈收缩，故可用于鉴定α受体兴奋药或阻滞药。脂肪组织存在β受体，凡能兴奋β受体的药物均能引起游离脂肪酸的释放增加。如预先加入β受体阻滞药，则可使游离脂肪酸的释放量明显减少，甚至完全阻断，故此法亦用来鉴定作用于β受体的药物。常选用不饥饿的雄性大白鼠，麻醉下取其副睾脂肪垫作实验。子宫平滑肌收缩为α受体兴奋反应，目前常选用兔子宫平滑肌膜与³H-DHE（即³H-Dihydrocryptne,是一个α受体阻滞药）进行体外培养，³H-DHE与子宫平滑肌膜上α受体结合，25℃不超过17分钟，即能完全达到结合，而且结合稳定性较好，至少可维持39分钟，常用来鉴定α受体。

　　（七）骨骼肌松弛药实验

　　在进行神经肌接点阻断药试验研究时，动物品种的选择是十分重要的，因神经肌接点阻断药的效应有明显的动物种属差异，只有选用在反应性质和程度与人相似的动物进行实验，所得结果才对临床用药有较高的参考价值。

　　不同种动物对同一种神经肌接点阻滞药的反应不同，如猫、狗、兔、大白鼠对十烃季铵和筒箭毒的敏感性各不相同，其间差异见图10-8、表10-30所示。不同种属动物对神经肌接点阻断药反应的差异不仅表现在作用强度上，而且反应在作用性质上，如猫对琥珀酰胆碱、十烃季铵的反应与人近似，呈单纯去极化型阻断作用，而在兔、豚鼠、大白鼠常表现为双相阻断作用。鸡对十烃季锓特别敏感，大白鼠对筒箭毒敏感，人对十烃季铵与筒箭毒的反应介于猫对狗之间而与猫近似。虽然蛙、兔、小鸡、小白鼠等动物在神经肌接点阻断药的试验研究上各有应用价值，如蛙可在不用人工呼吸的条件下作用于观察神经肌接点阻断药的作用，小鸡可用于区别去极化型阻断药与非去极化型阻断药，兔垂头法可用于观察神经肌接点阻断药的效应和鉴定其效价，小白鼠用于神经肌接点阻断药的初筛，但以猫对神经肌接点阻断药的的反应与人最近似，故猫是必不可少的试验动物，但也不是一切试验均需要在猫身上进行。

图10-3不同种实验动物对十烃季铵和筒箭毒的敏感性

表10-30　一些神经肌接点阻断药对人、猫、大白鼠的相对效价*

动　　　物	人	猫	大　白　鼠
氯化筒箭毒	1/(10mg)	1/(0.4mg/kg)	1/(0.07mg/kg)
三乙基碘化格拉明	0.2/(50mg)	0.26/(1.5mg/kg)	0.02/(3.5 mg/kg)
甲基硫酸劳德克辛	0.5/(20mg)	0.7/(0.6mg/kg)	0.04/(2 mg/kg)
氯化苯唑醌铵	1/(10mg)	1.6/(0.25mg/kg)	0.07/1 mg/kg)
碘化十烃季铵	4.5/(2.24mg)	10/(0.04mg/kg)	0.04/2 mg/kg)
氯化琥珀酰胆硷	1/(10mg)	8/(0.05mg/kg)	0.07/1 mg/kg)
溴化氨酰胆硷	4.5/(2.24mg)	20/(0.02mg/kg)	0.05/1.5 mg/kg)

　　 *每格中上面数字是以筒箭毒用为1m算出的相对强度。插号中数字为产生90-95%神经肌接点阻断作用所需剂量。

三、心血管系统药理实验中的选择与应用

　　（一）血压测量

　　插管直接测压法：在研究中经常应用动物急性血压试验来分析药物等对循环系统的影响，常用的动物有狗、猫、家兔和大白鼠。猴、羊、豚鼠、小鼠、鸡、鸟和蛙的血压值和急性测压法虽有报告，但极少用于药物对血液循环影响的常规研究。各种动物的血压值可参看表10-31。

表10-31　各种动物的血压值

动物种类	动物数与性别	麻醉情况	血压（mmHg）
			收　缩　压	舒　张　压
猴	14	不麻醉 -	159（137～188） 124～175	127（112～152） 105～138
马	173♂ 43♀ 青年5♂ 3♀	不麻醉 ″ ″ -	98（90～144） 90（86～98） 80 80～90	64（46～86） 59（43～84） 50 50～65
牛	- 青年4 -	不麻醉 - -	134（124～166） 157（133～177） 134	88（80～120） 88
山　羊	- -	不麻醉 -	120（112～126） 80～120	84（76～90） 42-84
绵　羊	13 -	局麻	114（90～140） 114	68
猪	- -	不麻醉 -	169（144～185） 170	108（98～120） 110
狗	13 22 67♂ 80♀ -	不麻醉 戊巴比妥钠 巴比妥钠 ″ -	112（95～136）　　56（43～66） 149（108～189）　　100（75～122） 134（85～190） 125（60～170） 80～180　 45～100
猫	5 191♂ 208♀ -	巴比妥或乙醚 戴爱尔或氨基 甲酸乙酯 ″ -	120　　　　　　　　75 129（67～216） 121（62～200） 120～155　　　 75～100
兔	32 -	不麻醉 -	110（95～130） 70～150	80（60～90） 60～90
豚　鼠	8 -	乙醚、戊巴比妥 -	110（28～140）　　　 47（16～90） 81～90
田　鼠	-	-	90～170
大　鼠	124 100 -	戊巴比妥钠 不麻醉 -	129（88～184） 98（82～120） 60～150	91（58～145） - 60～110
小　鼠	9 青年19 -	氨基甲酸乙酯 或乙醚 不麻醉 -	113（95～125） 117（95～138） 90～160	81（67～90） - 70～110
金地鼠	-	戊巴比妥纳	120～170
鸡	-		88～170
鸭	-	-	88～170
鹅	-	-	88～170
鸽	-	-	135
鲤　鱼	-	-	43
蛙	-	-	20～60	20～40
蟾　蜍			48

　　 大白鼠血压除对个别药物（如毒扁豆碱）反应异常外，对绝大多数的升压和降压物质的反应都和人或大动物（如狗、猫）是一致的，并且反应十分灵敏，目前它是检定体液或组织中去甲肾上腺素等升压物质含量的常用动物之一。大白鼠来源容易解决，较经济、用药量少、所占工作面小。缺点是动物小，操作较因难，血管较细小，易发生血液凝固，故须预先注射肝素抗凝。用狗作实验优点很多，如血压恒定，较大白鼠、家兔等小动物更接近人体，对药物反应灵敏并与人基本一致；血管和神经较粗，管壁弹性强，便于手术操作和适用于分析药物对循环系统的作用机制；心搏力量强，能描绘出完好的血压曲线；用作药物筛选时，可反复应用。缺点是来源较困难，人体贵，不适用于需要动物数量较多的实验。猫用于血压试验时除有与狗相同的优缺点外，特别值得指出的是更适用于药物对循环系统作用机制的分析，因为猫不仅有瞬膜，便于分析药物对交感神经节和节后部分的影响，而且易于制备脊髓猫以排除脊髓以上的中枢神经系统对血压的影响。此外，猫体重较狗轻（实验可用1.8～2.5kg体重的猫），用药量较省。家兔来源容易，性情温和，故亦常用血压试验。但并不理想，因为家兔为草食动物，个体间血压差异大，对药物反应不及上述各种动物恒定和灵敏，较脆弱，尤其是长毛大耳家兔易死亡，故它不适用于血压试验，血管较小和心搏力量较弱，插管内易发生血凝块。而且约有20～30%的家兔在颈动脉上向甲状腺分出的一根小动脉，碰到这一情况，宜将此分枝反线结扎剪断，否则在其上方插入动脉插管后，当检压计加压或开放动脉夹时，较大量的枸橼酸钠可经过此侧技，造成家兔深吸气和血压激烈波动，枸橼酸钠倒入心脏而死亡。

　　不插管（间接）测压法：在不插管测压法中最常用的动物是狗、大白鼠和家兔。大白鼠不插管测压法，常选用大白鼠尾容积测压法、鼠尾搏动投影响测压法和鼠脚测压法。狗不插管测压法选用颈动脉皮桥法、胫动脉间接测压法和股动脉穿刺测压法。家兔不插管测压常选用颈动脉皮桥测压法和兔耳测压法。

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